[發明專利]一種基于三嗪環結構限定性N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉抗原、抗體及應用

有效

• 申請號: 201711308738.4
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108059622B
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 沈玉棟;鄒婷婷;楊金易;徐振林;王弘;肖治理;羅林;雷紅濤;孫遠明
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07D251/18
• 分類號: C07D251/18;C07K14/77;C07K14/765;C07K16/44;G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

本發明一種基于三嗪環結構限定性N?(2?胍基?乙亞氨基)?嗎啉半抗原、人工抗原、抗體及應用。所述N?(2?胍基?乙亞氨基)?嗎啉半抗原的結構如式I所示：其中R為?H和?CH3。并以此制備了N?(2?胍基?乙亞氨基)?嗎啉人工抗原和抗體，對N?(2?胍基?乙亞氨基)?嗎啉的檢測效率高、操作簡便，可用于N?(2?胍基?乙亞氨基)?嗎啉的酶聯免疫快速檢測；且本發明的抗原抗體合成過程簡單、成本較低，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于藥物殘留分析檢測技術領域。更具體地，涉及一種基于三嗪環結構限定性N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉半抗原、人工抗原、抗體及應用。

背景技術

N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉鹽酸鹽(Moroxydine Hydrochloride，簡稱鹽酸嗎啉胍，俗稱“病毒靈”)，其核心有效成分為N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉，分子式為C6H13N5O·HCl，分子量為207.66。由于N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉能有效降低或抑制病毒的DNA聚合酶、RNA聚合酶的活性和蛋白質的合成等，其作為一種非核苷類廣譜抗病毒藥物，不僅廣泛的應用于治療流感、皰疹和水痘等病毒引起的疾病，在養殖業和種植業病毒性疾病防治方面應用也較多。

2014年，西安、吉林等地曝光了多起“病毒靈”事件，引起了人們對該藥物的廣泛關注。事件的起因主要是幼兒長期服用鹽酸N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉片，導致不少學生出現了腹痛、心慌、皮癢、嘔吐、頭暈等狀況，嚴重者還會出現心悸、低血糖、呼吸急促、寒顫等反應。由此可知，鹽酸N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉作為抗病毒藥仍然有其療效不確切，處方是否合理等問題。目前可以從煙草、糙米、番茄、蜂蜜和動物組織等中檢測到N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉的殘留，另外，在環境土壤中的殘留情況也不太樂觀，這些情況不僅會導致耐藥性病毒的增加，而且為人們的健康埋下了安全隱患。因此對動植物源性食品和環境中N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉殘留的檢測具有重要意義。

目前，對于藥品和食品中N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉的傳統的檢測方法，大多依靠常規儀器分析方法，如高效液相色譜法、液相色譜-電噴霧串聯質譜法等方法。這些方法存在周期長、專業性強，費用高等缺點，難以滿足現場快速檢測的需要，在應用上不能廣泛推廣。基于抗原-抗體特異性識別的酶聯免疫分析方法(ELISA)具有快速、靈敏、準確等優點，特別適用于現場進行高通量檢測。另外，ELISA因其能彌補儀器法的上述不足，已在食品安全檢測中發揮了重要作用。

而ELISA法對于抗原、免疫原的選擇要求較高，小分子化合物(MW≤1000Da)一般不具有免疫原性，不能直接免疫動物產生特異性抗體，但可與抗體產生反應，即具有反應原性。如果將小分子連接到具有免疫原性的大分子(通常為蛋白質)上，做成人工抗原，就可能使機體產生免疫應答，產生針對小分子結構的抗體。因為不是任何小分子與大分子載體連接都能產生特異性抗體，所以小分子半抗原結構的設計非常重要。建立酶聯免疫分析方法的關鍵在于其半抗原和人工抗原的設計和合成。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服上述現有N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉檢測技術存在的存在周期長、專業性強、成本高，不適宜現場大批量快速檢測，以及無法實現N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉的直接快速檢測等問題、缺陷和不足，提供一種基于三嗪環結構限定性N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉半抗原，同時提供由所述半抗原偶聯載體蛋白制備的人工抗原，以及免疫實驗動物后使機體產生特異的針對N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉的抗體；可用于N-(2-胍基-乙亞氨基)-嗎啉的檢測，檢測效率高、操作簡便。