[發明專利]一種β-激動劑半抗原和人工抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711306446.7
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108181463B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 雷紅濤;姜文夢;王蘭騰;沈興;陳佳虹;孫遠明;徐振林;李向梅
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;G01N33/558
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 單香杰

本發明公開了一種β?激動劑半抗原，其分子結構如下式（I）所示：。本發明以R?(?)?沙丁胺醇為原料，經一步化學反應成功合成了β?激動劑半抗原。再將該半抗原與載體蛋白偶聯制備人工抗原，經免疫后得到廣譜特異性β?激動劑人工抗體。該抗體可以識別31種β?激動劑藥物及其類似物，其中對R?(?)?沙丁胺醇的半抑制濃度為0.5ng/mL，線性范圍為0.11～40.86ng/mL，最低檢測限為0.04ng/mL。該抗體能同時檢測多種β?激動劑類藥物，可用于食品安全的現場快速檢測，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及食品安全檢測技術領域，具體地，涉及一種β-激動劑半抗原和人工抗體及其制備方法和應用。

背景技術

β-激動劑（β-agonist）是β-腎上腺素受體激動劑（β-adrenoceptor agonist）的簡稱，屬于苯乙胺類藥物的一種，β-激動劑從醫學上分類歸屬于擬交感神經作用藥，因其能夠改變能量分配，降低脂肪生成，促進脂肪分解，促進蛋白質合成并減少其降解，上世紀80年代就有將β-激動劑添加到飼料中用以提高牛、羊、豬等牲畜的瘦肉生長率的相關報道。當人體累計攝入劑量超過閾值或食入高殘留的動物內臟組織時，β-激動劑會產生明顯的生理毒性，導致心悸、戰栗、頭暈目眩、惡心嘔吐、血管舒張、神經過敏、心跳加速等癥狀，嚴重的甚至有可能導致死亡，因此世界各國已禁止將這類物質用于食品動物。

然而，作為“瘦肉精”使用的β-激動劑卻先后出現，例如克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、溴布特羅等藥物被不法商家用于謀取利益。其中，沙丁胺醇具有手性結構，在生理情況下，左旋異構體能更好的與受體結合表現出生理活性，因此R-(-)-沙丁胺醇多作為臨床治療哮喘等呼吸系統疾病的藥物。R-(-)-沙丁胺醇作為沙丁胺醇外消旋體的活性結構，應該作為重點監控檢測的對象，在食品加工、貯藏和銷售等環節加強此類藥物的監控檢測是十分必要的。但是目前尚未出現對β-激動劑手性結構以及廣譜特異性的檢測方法。

目前，β-激動劑的檢測方法主要有高效液相色譜（HPLC）、液相色譜-串聯質譜（LC-MS或LC-MS/MS）、氣相色譜（GC-MS）、毛細管電泳色譜（CE）等。這些方法雖然準確度高，但其儀器設備昂貴、樣品前處理復雜繁瑣、檢測成本高且需要專業人員操作等，不能實現高通量快速檢測的目的。而免疫檢測方法具備快速、靈敏、準確、操作簡便等特點，且對樣品純度要求不高，適用于大批量樣品的現場快速檢測。雖然目前多數檢測β-激動劑的抗體均具有較高特異性，但卻無法實現在同一實驗中檢測多種可能添加的β-激動劑。由于β-激動劑濫用的危害性較大，目前迫切需要能同時識別、檢測多種β-激動劑的免疫檢測方法，尤其是能夠同時識別多種β-激動劑的抗體。

發明內容

本發明要解決的技術問題是針對現有技術中沒有能同時識別多種β-激動劑的抗體，為了克服現有技術的上述不足，提供一種β-激動劑半抗原，以該半抗原與載體蛋白偶聯制備的人工抗原為免疫原，制備的廣譜特異性β-激動劑人工抗體，能同時檢測多種β-激動劑類藥物，可用于食品安全的現場快速檢測。

本發明的目的是提供一種β-激動劑半抗原。

本發明的另一目的在于提供所述β-激動劑半抗原在制備β-激動劑人工抗原或抗體中的應用。

本發明的另一目的在于提供所述β-激動劑半抗原的制備方法。

本發明的另一目的在于提供一種β-激動劑人工抗原。

本發明的另一目的在于提供所述β-激動劑人工抗原的制備方法。

本發明的另一目的在于提供一種廣譜特異性β-激動劑人工抗體。

本發明的另一目的在于提供所述廣譜特異性β-激動劑人工抗體在制備檢測β-激動劑藥物和/或其類似物的試劑盒中的應用。

本發明的另一目的在于提供一種檢測β-激動劑藥物和/或其類似物的試劑盒。