[發明專利]一種β-激動劑半抗原和人工抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711306446.7
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108181463B
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: 雷紅濤;姜文夢;王蘭騰;沈興;陳佳虹;孫遠明;徐振林;李向梅
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;G01N33/558
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 單香杰

1.一種廣譜特異性β-激動劑人工抗體，其特征在于，是由β-激動劑人工抗原作為免疫原制備后純化得到，包括如下步驟：

1、免疫：

將β-激動劑人工抗原溶液與等量佐劑混合乳化，初次免疫與弗氏完全佐劑混合乳化后免疫，4周后使用免疫原與弗氏不完全佐劑乳化后加強免疫，每次加強免疫間隔3周，每次免疫劑量為6mL/只；第三次免疫后第7天開始取血檢測抗血清效價，直至抗血清效價不再長，取血后采用室溫自然凝固后分離抗血清，在4℃下放置過夜，于4000r/min條件下離心30min，取上層血清；

2、純化：

(1)取3mL抗血清，加入2倍體積的0.06mol/L、pH為4.8的醋酸鈉緩沖液；

(2)將225μL正辛酸邊攪拌邊逐滴加入樣品液中，加完后繼續攪拌30min，于4℃下靜置2h；

(3)于4℃、10000r/min條件下離心10min，取上清，加入上清液1/10體積的0.1mol/L、pH為7.4的PBS溶液，用1mol/L NaOH溶液調節pH至7.4；

(4)冰浴條件下，加入0.277g/mL硫酸銨(使最終飽和度為45％)，攪拌1h，于4℃、10000r/min條件下離心10min，棄上清；

(5)用2mL PBS溶液溶解沉淀，用0.01mol/L、pH為7.4的PBS溶液透析過夜，換液7次，得到純化后的廣譜特異性β-激動劑人工抗體；

所述β-激動劑人工抗原是由分子結構如下式(I)所示的β-激動劑半抗原與載體蛋白偶聯得到；

2.權利要求1所述廣譜特異性β-激動劑人工抗體在制備檢測β-激動劑藥物和/或其類似物的試劑盒中的應用。

3.一種檢測β-激動劑藥物和/或其類似物的試劑盒，其特征在于，含有權利要求1所述β-激動劑半抗原、β-激動劑人工抗原或廣譜特異性β-激動劑人工抗體。