[發(fā)明專利]一種可以將根皮苷轉化為根皮素的真菌及其用途

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• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108251311A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發(fā)明（設計）人: 劉成航;賈秀娟;張晨曦
• 申請（專利權）人: 天津華泰至成醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/26;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供一種用于將根皮苷轉化為根皮素的真菌及其應用，該標準菌種的分類命名為長柄鏈格孢菌(Alternaria longipes)，購自中國中國科學院微生物研究所，保藏編號為AS3.2875。本發(fā)明還提供了基于該真菌轉化制備根皮素的方法。本發(fā)明提供的真菌與傳統(tǒng)的轉化方法相比，產(chǎn)率高，無環(huán)境污染。

技術領域

本發(fā)明屬于微生物轉化技術領域，涉及一種用于將根皮苷轉化為根皮素的真菌及其用途。

背景技術

已知的是，根皮苷主要用于治療糖尿病，而其去糖苷得到根皮素。根皮素是存在于蘋果、梨等水果及多種蔬菜中天然的二氫查耳酮類物質，因在這些植物中的根莖和根皮中含量較為集中而得名。根皮素比根皮苷具有更廣泛的生物活性和藥理作用：降血糖、清除氧自由基、美白、心血管保護、抗腫瘤、抗炎、免疫抑制、弱的雌激素樣活性等。因此廣泛應用于保健品、藥品、化妝品等行業(yè)，并受到國內(nèi)外學者的廣泛關注，特別是在美白和抗癌作用方面。

根皮素在自然界的分布較少，主要存在蘋果、梨、荔枝等多汁植物的果皮、根莖及根皮，并且提取分離較為困難。目前根皮素的合成方法主要分為生物合成和化學合成，但這兩種方法在不同程度上均存在著缺陷：得率低、副產(chǎn)物較多、有一定的污染等。

微生物轉化是利用微生物代謝過程中產(chǎn)生的某個或某一系列的酶對底物特定部位（基因）進行的催化反應，這一過程避免了生物合成和化學合成過程中的缺點，為解決某些藥用化合物的緊缺提供了新的途徑。

因此，利用已有微生物定向轉化根皮苷為根皮素，以使根皮素更好地應用于臨床。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的是為了滿足當前對根皮素的大量需求，提供了利用一株真菌將根皮苷轉化為根皮素的方法，本發(fā)明的方法有助于根皮素的擴大生產(chǎn)，以滿足當前市場對于根皮素的需求，進而為根皮素的臨床深入研究提供物質基礎。

為解決上述問題，本發(fā)明采用的技術方案如下：用于將根皮苷轉化為根皮素的真菌采用現(xiàn)有菌種，該標準菌種的分類命名為長柄鏈格孢菌(Alternaria longipes )，保藏于天津市華泰至成醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司研發(fā)部微生物實驗室。

本發(fā)明所述的菌株購自中國中國科學院微生物研究所，保藏編號為AS3.2875。由于該菌種可通過現(xiàn)有渠道直接獲得，故而該生物材料屬于現(xiàn)有技術中可直接獲得的材料，不需進行單獨的生物保藏。

本發(fā)明提供了一種將根皮苷轉化為根皮素的方法，該方法采用上述真菌進行轉化。

優(yōu)選地，所述方法包括以下步驟。

1）馬鈴薯液體培養(yǎng)基（PDA斜面培養(yǎng)基）及馬鈴薯瓊脂斜面培養(yǎng)基（PDA斜面培養(yǎng)基）的配制：

選用市售新鮮馬鈴薯200 g，將馬鈴薯去皮，切制成小塊狀，加入適量水煮沸，計時30min。然后將馬鈴薯水煮液紗布過濾，加水至1000 mL。稱取葡萄糖 20 g，溶于馬鈴薯水煮液中，即得馬鈴薯液體培養(yǎng)基。馬鈴薯液體培養(yǎng)基每200ml裝入一個500ml的錐形瓶中，分裝好后培養(yǎng)基封口，于1.06 kg/cm²壓力下121 ℃濕熱滅菌30 min，放涼以用來制備發(fā)酵液。取馬鈴薯液體培養(yǎng)基100 mL，加入瓊脂2 g，加熱溶解，并且趁熱分裝，每5 mL至每支15 mL試管中。將分裝好的培養(yǎng)基用橡膠塞封口，于1.06 kg/cm²壓力下121 ℃濕熱滅菌30 min。滅菌后趁熱取出試管，傾斜放置，待培養(yǎng)基凝固，冷卻后即成馬鈴薯瓊脂斜面培養(yǎng)基，以用來接種菌株。

2）真菌的培養(yǎng)：