[發明專利]一種可以將根皮苷轉化為根皮素的真菌及其用途

在審

• 申請號: 201711305344.3
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108251311A
• 公開（公告）日: 2018-07-06
• 發明（設計）人: 劉成航;賈秀娟;張晨曦
• 申請（專利權）人: 天津華泰至成醫藥科技發展有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/26;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于將根皮苷轉化為根皮素的真菌，其特征在于：所述真菌為長柄鏈格孢(Alternaria longipes )。

2.如權利要求1所述的真菌在制備根皮素中的用途。

3.一種將根皮苷轉化為根皮素的方法，其特征在于，所述方法包括采用如權利要求1所述的真菌轉化。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

1）馬鈴薯液體培養基（PDA斜面培養基）及馬鈴薯瓊脂斜面培養基（PDA斜面培養基）的配制：

選用市售新鮮馬鈴薯200 g，將馬鈴薯去皮，切制成小塊狀，加入適量水煮沸，30 min；然后將馬鈴薯水煮液紗布過濾，加水至1000 mL；稱取葡萄糖 20 g，溶于馬鈴薯水煮液中，即得馬鈴薯液體培養基；馬鈴薯液體培養基每200ml裝入一個500ml的錐形瓶中，分裝好后培養基封口，于1.06 kg/cm²壓力下121 ℃濕熱滅菌30 min，放涼以用來制備發酵液；取馬鈴薯液體培養基100 mL，加入瓊脂2 g，加熱溶解，并且趁熱分裝，每5 mL至每支15 mL試管中；將分裝好的培養基用橡膠塞封口，于1.06 kg/cm²壓力下121 ℃濕熱滅菌30 min；滅菌后趁熱取出試管，傾斜放置，待培養基凝固，冷卻后即成馬鈴薯瓊脂斜面培養基，以用來接種菌株；

2）真菌的培養：

將純化后的菌體制成10⁴CFU/ml的菌懸液，將菌懸液加入到液體培養基中，其中菌懸液與液體培養基的體積比為1：100，置于恒溫振蕩器上，恒溫振蕩器轉速為160 rpm/min，28℃培養2天；

3）根皮苷的轉化：

加入根皮苷溶液，使得發酵液中含根皮苷的濃度為0.1mg/ml，繼續培養3d；

4）根皮素的萃取：

發酵后的發酵液用等體積的水飽和正丁醇萃取，將萃取后的正丁醇層旋干，得到轉化產物浸膏。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，在步驟2）中，所述恒溫振蕩器的轉速為50-300 rpm/min，優選地為100-200rpm/min，更優選地為160 rpm/min。

6.根據權利要求4或5所述的方法，其特征在于，在步驟2）中，培養溫度為26-30℃，更優選地為28℃。

7.根據權利要求4~6中任一項所述的方法，其特征在于，在步驟2）中，所述菌懸液的濃度為10⁴CFU/ml。

8.根據權利要求4~7中任一項所述的方法，其特征在于，在步驟2）中，所述菌懸液與液體培養基的體積比為1:100。

9.根據權利要求4~8中任一項所述的方法，其特征在于，將得到的根皮素用甲醇復溶，進行HPLC檢測和分析。