[發(fā)明專利]硼酸酯類化合物的非水反相色譜檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711304941.4
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN108132323A
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李進(jìn)晨;藍(lán)仁青;趙初芒;蔣競
• 申請（專利權(quán)）人: 常州合全藥業(yè)有限公司;常州合全新藥研發(fā)有限公司
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89
• 代理公司: 上海浦一知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31211
• 代理人: 鄭權(quán)

本發(fā)明公開一種硼酸酯類化合物的非水反相色譜檢測方法，其是在反相液相系統(tǒng)中以有機(jī)溶劑代替常規(guī)水相，其流動(dòng)相組分均為有機(jī)溶劑，采用等度或梯度模式，通過常規(guī)C18或石墨化碳色譜柱即可實(shí)現(xiàn)對硼酸酯類化合物的有效分離。本發(fā)明涉及的硼酸酯類化合物為硼酸頻那醇內(nèi)酯類化合物，為一分子硼酸或取代硼酸與一分子頻那醇縮合形成的五元環(huán)內(nèi)酯化合物。本發(fā)明的方法能避免硼酸酯化合物的遇水不穩(wěn)定性，并且加入不同的有機(jī)相溶液作為改性劑，可以改變不同硼酸酯化合物的選擇性，該方法準(zhǔn)確定性定量，峰形好，分離度高，快速高效，且化合物分離環(huán)境穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種分析化學(xué)領(lǐng)域的檢測方法，具體涉及一種硼酸酯類化合物的液相色譜非水反相檢測方法。

背景技術(shù)

硼酸酯類化合物起初被用于潤滑油添加劑，隨著醫(yī)藥行業(yè)的迅猛發(fā)展，硼酸酯類尤其是硼酸內(nèi)酯類化合物(如硼酸頻那醇內(nèi)酯等)成為許多活性藥物成分的關(guān)鍵中間體，在醫(yī)藥學(xué)中適用于多種生物學(xué)活性。例如選擇性地阻斷腫瘤細(xì)胞的增殖，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，有效地抑制人體腫瘤細(xì)胞生長等。然而對于硼酸酯類藥物中間體的分析方法仍然存在諸多問題。

例如硼酸酯遇水不穩(wěn)定，其易水解的本質(zhì)是因?yàn)榕鹪訛閟p2雜化，還存在一個(gè)空的p軌道，這個(gè)空軌道易于接受水和醇等帶有未共用電子對的親和試劑的進(jìn)攻而使硼酸酯水解。所以，常規(guī)的反相色譜分析無法實(shí)現(xiàn)對硼酸酯類化合物的分析分離檢測以及制備，硼酸酯類化合物極易在柱內(nèi)或系統(tǒng)內(nèi)發(fā)生水解。而正相色譜法的操作繁瑣，影響因素多，不能作為常規(guī)檢測方法；若采用氣相則對化合物的熱穩(wěn)定性要求較高，且只適用于低沸點(diǎn)的化合物，同樣的干擾因素多，存在局限性。

因此，本領(lǐng)域需要開發(fā)一種克服硼酸酯類藥物中間體遇水不穩(wěn)定且使用普通反相液相系統(tǒng)來進(jìn)行檢測的分析方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，提供一種硼酸酯類化合物的非水反相色譜檢測方法，以解決克服現(xiàn)有技術(shù)中硼酸酯類化合物遇水不穩(wěn)定，不能使用普通反相液相系統(tǒng)來進(jìn)行檢測的問題。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種硼酸酯類化合物的非水反相色譜檢測方法，其是在反相液相系統(tǒng)中以有機(jī)溶劑代替常規(guī)水相，其流動(dòng)相組分均為有機(jī)溶劑，采用等度或梯度模式，通過常規(guī)C18或石墨化碳色譜柱即可實(shí)現(xiàn)對硼酸酯類化合物的有效分離，準(zhǔn)確定性定量，峰形好，分離度高，快速高效，且化合物分離環(huán)境穩(wěn)定性好。

具體的，所述硼酸酯類化合物為硼酸頻那醇內(nèi)酯類化合物，所述硼酸頻那醇內(nèi)酯類化合物為一分子硼酸或取代硼酸與一分子頻那醇縮合形成的五元環(huán)內(nèi)酯化合物；其結(jié)構(gòu)式如式I所示：

其中，R為羥基或硼酸取代基，硼酸取代基包括本領(lǐng)域現(xiàn)有的各種硼酸取代基或經(jīng)常規(guī)化學(xué)反應(yīng)可以制得的硼酸取代基。

具體的，所述流動(dòng)相組分選自甲醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、乙腈。

具體的，所述流動(dòng)相的優(yōu)選為甲醇/乙腈體系，四氫呋喃/乙腈體系，二氯甲烷/乙腈體系、四氫呋喃/二氯甲烷體系。

具體的，所述色譜柱選自Waters Xbridge C18色譜柱、Thermo Hypercarb色譜柱。

具體的，所述的液相色譜條件參數(shù)，如流動(dòng)相比例、流速、柱溫等，可根據(jù)化合物具體的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)按常規(guī)方法進(jìn)行合理調(diào)節(jié)和選擇。

具體的，所述流動(dòng)相為甲醇/乙腈體系，采用等度體積比的甲醇/乙腈＝90/10。

具體的，所述流動(dòng)相為四氫呋喃/乙腈體系，采用等度體積比的四氫呋喃/乙腈＝10/90。

具體的，所述流動(dòng)相為二氯甲烷/乙腈體系，采用等度體積比的二氯甲烷/乙腈＝20/80。

具體的，所述流動(dòng)相為四氫呋喃/二氯甲烷體系，采用等度體積比的四氫呋喃/二氯甲烷＝50/50。