[發明專利]瘧疾快速檢測

在審

• 申請號: 201711303510.6
• 申請日: 2017-12-08
• 公開（公告）號: CN108088996A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 王偉;何建安;顧大勇
• 申請（專利權）人: 深圳市檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N21/552
• 代理公司: 深圳市行一知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 44453
• 代理人: 楊賢

本發明屬于醫學檢測技術領域，涉及一種瘧疾的快速檢測技術，包括檢測芯片及其制備方法和檢測裝置等。本發明的瘧疾檢測芯片包括SPR芯片和固定于其上的HRP2抗原或由它們組成。本發明的瘧疾檢測芯片的制備方法包括：a)獲得清潔的SPR芯片；b)將所述SPR芯片浸入活化液活化20?40分鐘；c)將濃度為300?600μg/ml的抗原溶液在所述SPR芯片上點樣；d)用含氨基的封閉液封閉芯片上未反應的活化表面。本發明的優勢在于可以實現對瘧疾的快速、簡單、準確的檢測。

技術領域

本發明屬于醫學檢測技術領域，涉及一種瘧疾的快速檢測技術，包括檢測芯片及其制備方法和檢測裝置等。

背景技術

瘧疾是廣泛流行于熱帶、亞熱帶的一種重要蟲媒傳染病，極大地威脅著人類的健康。近年來，由于瘧原蟲及其傳播媒介對藥物和殺蟲劑的抗性增強，以及外境人員輸入性傳染的影響，瘧疾的控制日益重要，而瘧疾的快速診斷對控制全球瘧疾的作用顯得尤為重要。

我國的瘧疾主要以輸入性瘧疾為主。目前主要的瘧疾診斷方法包括：顯微鏡鏡檢、免疫學診斷實驗、基于核酸擴增的檢測技術等。迄今為止，顯微鏡鏡檢(厚、薄血膜)仍是瘧疾診斷的金標準。但是顯微鏡鏡檢方法最大的問題在于費時費力，不適合臨床快速檢測和大規模樣品的篩查。同時由于瘧原蟲體形小，形態相似，難以染色和檢出，需要有經驗的人員才能做到正確的診斷。

免疫學診斷實驗因其成本較高且反應時間長，不能滿足臨床快速診斷的要求。

20世紀80年代以來隨著分子生物學的發展而出現的基因診斷技術(如分子雜交、PCR、熒光定量PCR等)顯示了較高的敏感性和特異性，可以對瘧原蟲的感染做出早期診斷。但需要更復雜的儀器設備和技術條件作為支持，不適合作為臨床常規的檢測手段，難以在基層推廣應用。

因此，尋找一種高通量、高敏感、快速、簡便的檢測方法對于瘧疾的防治具有重大的臨床意義。

表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)技術是一種光學傳感器檢測技術，利用表面等離子體共振原理，可將生物分子相互作用或生化反應的信號轉化成光信號進行傳感，具有無需標記、實時檢測、快速、靈敏度高等優點。

本領域尚未采用SPR技術實現瘧疾的快速診斷。

發明內容

為了克服本領域對于瘧疾快速檢測方法的需求，本發明提供了如下技術方案。

本發明意外發現，將瘧原蟲HRP2抗原固定在蛋白芯片上，以結合瘧疾的特異性抗體，結合現有的SPR技術，可以獲得一種高通量、高靈敏度的瘧疾檢測新技術。

本發明的一方面提供一種瘧疾檢測芯片，其包括SPR芯片和固定于其上的HRP2抗原。

本發明的一方面提供一種瘧疾檢測芯片，其由SPR芯片和固定于其上的HRP2抗原組成。

在本發明的一方面，SPR芯片具有和HRP2抗原的氨基反應的基團，所述基團優選為羧基。

在本發明的一方面，所述HRP2抗原通過濃度為300-600μg/ml的抗原溶液在所述SPR芯片上點樣而獲得。所述濃度例如是350μg/ml、400μg/ml、450μg/ml、500μg/ml或550μg/ml。

在本發明的一方面，所述瘧疾檢測芯片對HRP2抗體的最低檢測限為1.4μg/ml。

本發明的一方面提供一種瘧疾檢測芯片的制備方法，其包括：

a)獲得清潔的SPR芯片；

b)將所述SPR芯片浸入活化液活化；

c)將濃度為300-600μg/ml的抗原溶液在所述SPR芯片上點樣；

d)用含氨基的封閉液封閉芯片上未反應的活化表面。