[發明專利]一種熒光互補檢測人趨化因子生物學活性的方法有效
| 申請號: | 201711296510.8 | 申請日: | 2017-12-08 |
| 公開(公告)號: | CN108191979B | 公開(公告)日: | 2021-01-01 |
| 發明(設計)人: | 周亞鳳;王緒德;申兆興;劉雪賓 | 申請(專利權)人: | 上海晶諾生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K19/00 | 分類號: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;G01N33/68 |
| 代理公司: | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人: | 馮振寧 |
| 地址: | 200120 上海市浦東新*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 熒光 互補 檢測 人趨化 因子 生物學 活性 方法 | ||
1.一種用于檢測人趨化因子的生物學活性的細胞系,其特征在于,包含重組載體組合,所述重組載體組合為重組載體pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC和重組載體pCDNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN的組合,所述細胞系的制備方法為:
先將重組載體pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC轉染HeLa細胞,培養18~24h后,再將重組載體pCDNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN轉染上述細胞,用CXCL1、CXCL2或CXCL8處理轉染了重組載體pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC和重組載體pCNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN的上述細胞,對其進行熒光檢測;
所述重組載體pCDNA3.1-hCXCR2-linker-VC插入有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列;所述重組載體pCNA3.1-β-Arrestin2-linker-VN插入有SEQ ID NO.4所示核苷酸序列;
融合蛋白hCXCR2-linker-VC的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,融合蛋白β-Arrestin2-linker-VN的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;
融合蛋白hCXCR2-linker-VC的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;融合蛋白β-Arrestin2-linker-VN的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
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