[發明專利]一種提高尿促性素效價的方法

在審

• 申請號: 201711293332.3
• 申請日: 2017-12-08
• 公開（公告）號: CN109897095A
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發明（設計）人: 劉乃山;夏襯來;于曉娜
• 申請（專利權）人: 青島康原藥業有限公司
• 主分類號: C07K14/59
• 分類號: C07K14/59;C07K1/20;C07K1/18
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種提高尿促性素效價的方法，其特征在于，方法包括：將低效價尿促性素通過親和層析、離子交換層析進行純化，最終得到高純度的尿促性素，其特征在于，該方法包括如下步驟：

尿促性素粗品用含NaCl、EDTA的Tris-HCl緩沖液溶解，離心去沉淀，得上清液；

親和層析：用含NaCl的Tris-HCl平衡液平衡Argmatin- Sepharose柱，上清液上柱后，用含NaCl、鹽酸胍的Tris-HCl緩沖液洗脫，洗脫液經超濾脫鹽至無氯離子；

（3）離子交換層析：將上述超濾脫鹽后的溶液加NaCl和1mol/L Tris-HCl稀釋至一定濃度，上樣于DEAE-Sepharose Fast Flow柱，用含NaCl的Tris-HCl平衡液沖洗，換用含不同濃度NaCl的Tris-HCl洗脫液洗脫；紫外檢測，收集酶活性部分，超濾濃縮后冷凍干燥，即得成品。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的緩沖液是pH 6.0~8.0的含0.1~0.3mol/L NaCl、0.01~0.03 mol/L EDTA 的Tris-HCl緩沖液。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的平衡液是pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl Tris-HCl緩沖液。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中所述的洗脫液是pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl、0.1~0.3mol/L鹽酸胍的Tris-HCl緩沖液。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中所述稀釋后的終濃度為pH 7.0~9.0含0.05~0.30mol/L NaCl的Tris-HCl緩沖液。

6. 如權利要求1所述的方法，其特征在于， 步驟（3）中所述平衡液是pH 6.0~8.0含0.01~0.20mol/L NaCl 的Tris-HCl緩沖液。

7.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中所述洗脫液用pH 6.0~8.0含0.1~0.3mol/L NaCl的Tris-HCl緩沖液。