[發明專利]一種治療跌打損傷的中藥組合物的檢測方法

有效

• 申請號: 201711291628.1
• 申請日: 2017-12-07
• 公開（公告）號: CN107991425B
• 公開（公告）日: 2020-04-10
• 發明（設計）人: 田涵雯;王士青
• 申請（專利權）人: 長春人民藥業集團有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94;G01N30/02;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/06;G01N30/14;G01N31/16
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 魏征驥

1.一種治療跌打損傷的中藥組合物的檢測方法，所述中藥組合物是由下列步驟得到的：朱砂12.1份水飛成極細粉；冰片24.2份研磨成細粉；三七121.2份、制川烏12.12份、當歸20.2份、醋乳香20.2份、醋沒藥20.2份、石菖蒲8.1份粉碎成細粉，與朱砂粉末配研，過篩，混勻；其余梔子40.4份、制草烏12.12份、燙骨碎補40.4份、蒲公英60.6份、小薊6.7份、仙鶴草60.6份、紅花40.4份、菊花40.4份、蓮子心12.12份、重樓13.5份、醋延胡索20.2等十一味藥材加水煎煮二次，每次2小時，分次濾過，合并濾液，濃縮成70～75℃時測相對密度為1.23～1.25稠膏，與上述除冰片外的粉末混合，干燥，粉碎，混勻，加入冰片細粉，混勻；

檢測方法包括：當歸、冰片、梔子、三七和醋延胡索的薄層色譜鑒別和烏頭堿限量的檢查方法，其特征在于還包括：

(1)醋乳香的薄層鑒別，具體步驟如下：

(a)供試品溶液的制備：取本品2.5g，混勻，加乙醇20～40ml，超聲處理20～30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加乙醇1ml，作為供試品溶液；

(b)對照藥材溶液的制備：取乳香對照藥材0.2g，按供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；

(c)陰性樣品溶液的制備：取醋缺乳香的處方藥材，按處方比例及制備方法按供試品溶液制備方法制成陰性對照液；

(d)色譜條件與操作：照薄層色譜法(中國藥典2015年版通則0502)試驗，吸取上述三種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠GF₂₅₄薄層板上，以60℃～90℃石油醚：環已烷：乙酸乙酯：甲酸＝10:30:15:1為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm紫外光燈下檢視；

(e)結果特征：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；經方法學驗證其陰性樣品無干擾，說明該方法具備專屬性的特征；

(2)、菊花薄層鑒別，具體步驟如下：

(a)供試品溶液的制備：取本品6g，研細，加三氯甲烷30～50ml，加熱回流30分鐘，濾過，棄去濾液，藥渣揮干溶劑，加水80～100ml，加熱回流40～60分鐘，離心，取上清液，加鹽酸0.5～1.0ml，用乙酸乙酯振搖提取二次，每次40ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶液，做為供試品溶液；

(b)對照藥材溶液的制備：另取菊花對照藥材0.5g，按供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液；

(c)陰性樣品溶液的制備：取缺菊花的處方藥材，按處方比例及制備工藝按供試品溶液制備方法制成陰性對照液；

(d)色譜條件與操作：照薄層色譜法(中國藥典2015年版通則0502)試驗，吸取上述三種溶液各2～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，使成條狀，以乙酸丁酯：冰醋酸：水＝:2.5:(2.5～3)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；

(e)結果特征：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同的熒光條斑；經方法學驗證其陰性樣品無干擾，說明該方法具備專屬性的特征。

(3)三七的含量測定方法，步驟如下：

(a)色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以水為流動相B，按下表進行梯度洗脫；檢測波長為203nm，理論板數按三七皂苷R₁峰計算應不低于4000；

(b)對照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rg₁對照品、人參皂苷Rb₁對照品及三七皂苷R₁對照品適量，加甲醇制成每1ml含人參皂苷Rg₁ 0.4mg、人參皂苷Rb₁0.4mg、三七皂苷R₁0.1mg的混合溶液，即得；

(c)供試品溶液的制備取本品，研細，取0.7g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚100ml，低溫加熱回流提取3小時，棄去乙醚液，藥渣揮干溶劑，再加甲醇100ml，繼續回流提取4小時，放冷，收集提取液，用甲醇10ml分次洗滌容器及藥渣，洗液與提取液合并，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；

(d)測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，含人參皂苷Rg₁C₄₂H₇₂O₁₄、人參皂苷Rb₁C₅₄H₉₂O₂₃、三七皂苷R₁C₄₇H₈₀O₁₈的總量不得少于4.8mg；

(4)朱砂含量測定，采用沉淀滴定法測定，步驟如下：取本品，研細，取5g，精密稱定，置250ml凱氏燒瓶中，加硫酸20～40ml與硝酸鉀7～9g，加熱至近無色，放冷，轉入250ml錐形瓶中，用水50ml分次洗滌燒瓶，洗液并入溶液中，加1％高錳酸鉀溶液至顯粉紅色，兩分鐘內不消失，再滴加2％硫酸亞鐵溶液至紅色消失后，加硫酸鐵銨指示液2ml，用0.1mol/L硫氰酸銨滴定液滴定，每1ml硫氰酸銨滴定液相當于11.63mg的硫化汞HgS，本品每粒含朱砂以硫化汞HgS計，為9.5～13.5mg。