[發明專利]一種測定鱗狀上皮細胞癌抗原含量的試劑盒及其測試方法

在審

• 申請號: 201711288526.4
• 申請日: 2017-12-07
• 公開（公告）號: CN108169486A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 汪丹;劉振世;薛黎;金鑫;徐茜茜
• 申請（專利權）人: 江蘇澤成生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

本發明公開了一種采用磁微粒化學發光法測定人血清中鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC)含量的試劑盒。試劑盒包括校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；抗試劑為異硫氰酸熒光素標記的鱗狀上皮細胞癌抗原包被抗體和堿性磷酸酶標記的鱗狀上皮細胞癌抗原標記抗體；磁微粒試劑為磁微粒與羊抗FITC連接物。本發明以磁微粒子作為免疫反應的固相，利用化學發光酶聯免疫分析方法與化學發光類測定儀器配合，用于測定人體血清中的SCC含量,并且可以在全自動化學發光儀上同時測定多個樣本，實現SCC的高通量快速化測定，準確度高，特異性強，精確度和檢測效率有了較大的提高。

技術領域

本發明涉及生物化學技術領域，具體涉及一種采用磁微粒化學發光法測定人體中鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC)含量的試劑盒。

背景技術

鱗狀上皮細胞癌抗原是一組屬于絲氨酸/半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的糖蛋白，分子量為45，000道爾頓。SCC最初由Kato等人于鱗狀細胞癌組織中分離出來，至少由10個不同等電點的亞單位組成。

鱗狀上皮細胞癌抗原作為鱗狀細胞癌的腫瘤標志物，可以對宮頸癌、外陰癌、肺癌、食道癌等疾病進行檢測。對宮頸癌治療前血清中SCC水平可以作為早期預后指標，并對篩選出的高危病人進行輔助治療。更重要的是，治療前SCC水平的高低，反映了患者對放化療的敏感程度，同時也可評估療效，早期監測腫瘤是否復發，但不能作為惡性腫瘤早期診斷或確診的依據，不宜用于普通人群的腫瘤篩查。

目前已知的鱗狀上皮細胞癌抗原測定方法有放射免疫法(RIA)、酶聯免疫吸附法(ELISA)、膠乳增強比濁法等。放射免疫法步驟繁瑣，試劑價格昂貴，需使用配套的儀器且存在放射性污染。酶聯免疫吸附法存在檢測時間長、操作復雜、重復性差、不適于急診和臨床病人及時診斷的需要。膠乳增強免疫比濁法操作簡單、快速，但是靈敏度低、低值重復性差。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有的鱗狀上皮細胞癌抗原測定方法測定步驟繁瑣，試劑價格昂貴的缺陷，提供一種準確度高的采用磁微粒化學發光法測定人血清中鱗狀上皮細胞癌抗原(SCC)含量的試劑盒。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一種測定鱗狀上皮細胞癌抗原含量的試劑盒，包括校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；

所述磁微粒試劑是將抗異硫氰酸熒光素抗體與羧基磁珠偶聯制成，所述發光底物是將ALPS溶解于發光底物緩沖液中制成；

分別配制校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；將校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物，獨立地置于包裝容器內，得到鱗狀上皮細胞癌抗原的定量測定試劑盒；

(一)、所述校準品、質控品的配制，包括以下步驟：

用校準品緩沖溶液溶解SCC，配制抗試劑的校準品和質控品；其中，所述校準品緩沖溶液是通過在1L的新生牛血清中加入0.01g～0.05g的四環素和0.1g～0.5g的硫酸新霉素，完全溶解后經過0.22μm濾膜處理制備而成；

(二)、所述抗試劑的配制：

1)抗試劑緩沖液的制備：

將10g～20g的Tris、5g～6g的NaCl、0.5～1.0g的NaN3、1g～5g的綿羊血清、3g～10g的新生牛血清、1g～5g的馬血清加入1L純化水中，充分攪拌至完全溶解，用MgCl和ZnCl調節pH至8～9，制得抗試劑緩沖液；

2)異硫氰酸熒光素與SCC抗體偶聯，獲得異硫氰酸熒光素標記的鱗狀上皮細胞癌抗原包被抗體：