[發(fā)明專利]頭孢克肟及其有關(guān)物質(zhì)的檢測方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711283932.1
• 申請(qǐng)日: 2017-12-07
• 公開（公告）號(hào): CN109900812A
• 公開（公告）日: 2019-06-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙亞翡;張雪;姚云凡
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京濟(jì)美堂醫(yī)藥研究有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供一種采用高效液相分離與紫外檢測串聯(lián)的方式檢測頭孢克肟及其有關(guān)物質(zhì)的新方法，該方法穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好、操作簡單，可準(zhǔn)確的檢測出極性較小的雜質(zhì)，有利于藥品的質(zhì)量控制。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種第三代頭孢菌素類抗生素的藥物頭孢克肟有關(guān)物質(zhì)檢測方法。目前各國藥典有關(guān)物質(zhì)檢測方法均采用等度洗脫，極性較小的雜質(zhì)難以洗脫出來，為解決這一問題，我們摸索出一套適合頭孢克肟有關(guān)物質(zhì)檢測的分析方法，并進(jìn)行了系統(tǒng)的方法學(xué)驗(yàn)證。

背景技術(shù)

頭孢克肟是一種口服的第三代頭孢菌素抗生素，其結(jié)構(gòu)式如下：

為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，需嚴(yán)格控制其雜質(zhì)含量。目前，各國藥典均有收載頭孢克肟的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有關(guān)物質(zhì)檢測色譜條件及雜質(zhì)限度規(guī)定如下所述：

1、中國藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載的有關(guān)物質(zhì)色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以四丁基氫氧化銨溶液(取10％四丁基氫氧化銨溶液25ml，加水1000ml，搖勻，用1.5mol/L磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0)-乙腈(72:28)為流動(dòng)相；檢測波長為254nm；柱溫為40℃。

2、日本、美國藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載的有關(guān)物質(zhì)色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(125mm*4mm，4μm)；以四丁基氫氧化銨溶液(取0.4mol/L四丁基氫氧化銨溶液25ml，加水1000ml，搖勻，用10％磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6.5)-乙腈(300:100)為流動(dòng)相；檢測波長為254nm；柱溫為40℃，調(diào)節(jié)流速使主成分保留時(shí)間為10min。

3、歐洲、英國藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載的有關(guān)物質(zhì)色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(125mm*4mm，5μm)；以四丁基氫氧化銨溶液(取8.2g四丁基氫氧化銨，加水800ml使溶解，搖勻，用磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至6.5，加水稀釋至1000ml)-乙腈(750:250)為流動(dòng)相；檢測波長為254nm；柱溫為40℃。

4、各國藥典收載的有關(guān)物質(zhì)限度

5、以上各國藥典收載的頭孢克肟有關(guān)物質(zhì)檢測方法，流動(dòng)相體系一致，且均為等度洗脫，有機(jī)相比例最高為28％，樣品中極性較小的雜質(zhì)難以洗脫出來。

6、為解決樣品中極性較小雜質(zhì)洗脫出來的問題，我們摸索出一套適合頭孢克肟有關(guān)物質(zhì)檢測的分析方法。該方法快速簡便，穩(wěn)定性及專屬性良好；一定濃度范圍內(nèi)，濃度與峰面積之間線性關(guān)系良好；重復(fù)性試驗(yàn)、中間精密度試驗(yàn)及回收率試驗(yàn)RSD均小于2.0％；最低檢出量(S/N＝3)為0.1μg/ml(0.01％)；在色譜柱柱溫、流速、流動(dòng)相pH、檢測波長略有波動(dòng)及采用不同儀器或色譜柱時(shí)，檢測結(jié)果均一致，方法耐用性較好。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種將頭孢克肟樣品中極性較小的雜質(zhì)洗脫出來，且方法穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好，用于頭孢克肟有關(guān)物質(zhì)檢測。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采取的技術(shù)方案是：采用高效液相分離與紫外檢測串聯(lián)的方式分析檢測，具體如下：

1)色譜條件：

色譜柱：十八烷基鍵合硅膠鍵合硅膠為填充劑；

流動(dòng)相：A：乙腈-四丁基氫氧化銨溶液；B：乙腈；線性梯度洗脫：

流動(dòng)相的流速：0.8～1.2mL/min；

柱溫：35～45℃；

檢測波長：249～259nm；

檢測時(shí)間：60min；