[發(fā)明專利]一對(duì)用于神經(jīng)節(jié)苷脂定量篩查的浮力微球探針及制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711272434.7
• 申請(qǐng)日: 2017-12-01
• 公開（公告）號(hào): CN109870433B
• 公開（公告）日: 2021-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鞠熀先;陳云龍;劉惠普
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于細(xì)胞表面神經(jīng)節(jié)苷脂定量篩查的浮力微球探針，其特征在于，所述浮力微球探針包括提取探針和收集探針；所述提取探針為以二氧化硅浮力微球?yàn)檩d體，分別負(fù)載具有核酸內(nèi)切酶Eco47III切割位點(diǎn)和硼酸末端的功能DNA分子；所述功能DNA分子由DNA1和DNA2雜交形成，所述DNA1的3’端為巰基，通過(guò)琥珀酰亞胺和馬來(lái)酰亞胺雙修飾的聚乙二醇鏈連接到氨基硅烷化的二氧化碳浮力微球上；所述DNA1的5’端為羧基，通過(guò)共價(jià)結(jié)合氨基苯硼酸分子，用于特異性識(shí)別提取細(xì)胞表面含唾液酸基團(tuán)的生物分子；所述DNA2與所述DNA1中間部分雜交形成一個(gè)內(nèi)切酶Eco47III的酶切位點(diǎn)；所述提取探針能夠快速與細(xì)胞進(jìn)行作用和分離，實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞表面神經(jīng)節(jié)苷脂非破壞性的提取；所述收集探針通過(guò)直接對(duì)羥基化的二氧化硅浮力微球進(jìn)行十八烷硅烷化得到，所述收集探針通過(guò)疏水作用對(duì)釋放的神經(jīng)節(jié)苷脂進(jìn)行特異性收集，并進(jìn)一步利用雜交鏈反應(yīng)獲得熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面神經(jīng)節(jié)苷脂的定量檢測(cè)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的浮力微球探針，其特征在于，所述提取探針表面收集到的含唾液酸基團(tuán)的生物分子在內(nèi)切酶Eco47III酶切后，連同結(jié)合的核酸碎片釋放到溶液中，釋放物中含神經(jīng)節(jié)苷脂的分子被所述收集探針收集。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的浮力微球探針，其特征在于，所述收集探針表面收集的含神經(jīng)節(jié)苷脂的分子能夠由其結(jié)合的核酸碎片與引發(fā)序列雜交，引發(fā)雜交鏈反應(yīng)，獲得熒光信號(hào)。