[發明專利]麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株及其應用

有效

• 申請號: 201711263696.7
• 申請日: 2017-12-04
• 公開（公告）號: CN108103097B
• 公開（公告）日: 2021-01-08
• 發明（設計）人: 趙正言;黃耀偉;汪一龍;李建榮
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/54;C12N7/04;A61K39/165;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 王宏

1.一種麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒，其特征在于，通過定點突變包含麻疹病毒減毒疫苗株S191基因組重組載體中的麻疹病毒L蛋白上的甲基轉移酶保守序列得到；

所述甲基轉移酶保守序列為麻疹病毒結構蛋白中的L蛋白第VI保守區的氨基酸序列；氨基酸序列突變位點為G1788A，G1790A或G1792A。

2.根據權利要求1所述的麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒，其特征在于，所述包含麻疹病毒減毒疫苗株S191基因組重組載體為pYES-MV-S191。

3.根據權利要求2所述的麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒，其特征在于，對所述pYES-MV-S191中G1788，G1790或G1792氨基酸進行G到A的突變得到麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒pYES-MV-S191-G1788A、pYES-MV-S191-G1790A或pYES-MV-S191-G1792A。

4.根據權利要求3所述的麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒，其特征在于，

用于制備pYES-MV-S191-G1788A質粒的引物為：

G1788A-F：5’-gacggcttgttcttggctgagggatcgggttc-3’(SEQ ID NO.1)；

G1788A-R：5’-gaacccgatccctcagccaagaacaagccgtc-3’(SEQ ID NO.2)；

用于制備pYES-MV-S191-G1790A質粒的引物為：

G1790A-F:5’-gttcttgggtgaggcatcgggttctatgttg-3’(SEQ ID NO.3)；

G1790A-R:5’-caacatagaacccgatgcctcacccaagaac-3’(SEQ ID NO.4)；

用于制備pYES-MV-S191-G1792A質粒的引物為：

G1792A-F:5’-cttgggtgagggatcggcttctatgttgatcac-3’(SEQ ID NO.5)；

G1792A-R:5’-gtgatcaacatagaagccgatccctcacccaag-3’(SEQ ID NO.6)。

5.一種麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株，其特征在于，由輔助質粒pT7CFE1-N、輔助質粒pT7CFE1-P、輔助質粒pT7CFE1-L和權利要求1-4任一項所述的麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株質粒拯救得到；

其中，輔助質粒pT7CFE1-N含有麻疹病毒的核衣殼蛋白編碼基因；

輔助質粒pT7CFE1-P含有麻疹病毒的磷蛋白編碼基因；

輔助質粒pT7CFE1-L含有麻疹病毒RNA聚合酶編碼基因。

6.如權利要求5所述的麻疹病毒mRNA甲基轉移酶缺陷減毒疫苗株在制備預防或治療麻疹的疫苗中的應用。