[發(fā)明專(zhuān)利]改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711235458.5
• 申請(qǐng)日: 2017-11-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107916240A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 范楊艷;吳強(qiáng);王婷婷;馬禮耕;朱濤
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都?xì)W林生物科技股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/20
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/20;C12R1/46
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1，稱(chēng)取以下原料：

溶劑為注射用水的相對(duì)用量為1000ml：

含氮源為：胰酪胨：15～80g，胰胨：20～70g，精選大豆胨：10～80g，大豆胨：10～80g，酸水解酪蛋白：10～70g，酵母提取物：15～40g，酵母浸粉：5～40g中的任意三種組合物；

碳源為：葡萄糖：5.0～50g；

鹽類(lèi)為：K₂HPO₄：0～12.0g，KCl：0～7.0g，Na₂HCO₃：0～5.0g，NaCl：3.0～10.0g，MgSO₄·7H₂O：0.4～5.0g，CaCl₂：0～0.14g；

微量元素為：L-半胱氨酸鹽酸鹽：0.12～1.80g，煙酸：0.5～1.2mg，腺嘌呤：5.5～10.5mg，F(xiàn)eSO₄：2.5～6.5mg；

步驟2，采用注射用水對(duì)上述原料依次進(jìn)行溶解；

步驟3，將采用注射用水溶解后的混合溶液進(jìn)行定容到所需體積，并調(diào)節(jié)pH值；

步驟4，除菌后獲得液體培養(yǎng)基。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟2中，將所述原料均加入同一容器內(nèi)，然后向盛由原料混合物的容器中在不斷攪拌條件下加入注射用水；在添加完注射用水后，進(jìn)行加熱溶解。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述加熱溶解步驟為：先以1℃/min的升溫速率由25℃升溫至30℃，在30℃溫度條件下保持10min，然后以1℃/min的升溫速率由38℃升溫至35℃，在38℃溫度條件下保持5min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟3中，采用質(zhì)量濃度為10％的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0～7.8。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟4中，在無(wú)菌操作條件下經(jīng)0.1μm的過(guò)濾減壓過(guò)濾除菌。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的改進(jìn)液體培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，所述步驟1中，稱(chēng)取各原料的組成為，溶劑為水的相對(duì)用量為1000ml：

含氮源為：胰酪胨：55g，胰胨：50g，精選大豆胨：50g，大豆胨：45g，酸水解酪蛋白：45g，酵母提取物：28g，酵母浸粉：25g中的任意三種組合物；

碳源為：葡萄糖：25g；

鹽類(lèi)為：K₂HPO₄：6.5g，KCl：4.5g，Na₂HCO₃：2.5g，NaCl：6.0g，MgSO₄·7H₂O：2.6g，CaCl₂：0.09g；

微量元素為：L-半胱氨酸鹽酸鹽：1.12g，煙酸：0.9mg，腺嘌呤：8.5mg，F(xiàn)eSO₄：4.0mg。