[發明專利]一種探針系統及其制備方法與用途

在審

• 申請號: 201711232035.8
• 申請日: 2017-11-30
• 公開（公告）號: CN107961383A
• 公開（公告）日: 2018-04-27
• 發明（設計）人: 單玲玲
• 申請（專利權）人: 單玲玲
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;G01N21/64;A61K47/24;A61K47/26;A61K47/28
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙)11562
• 代理人: 宋平

技術領域

本發明屬于醫學領域，涉及一種靶向性熒光探針系統及其制備方法與用途，特別涉及一種能夠靶向結合腫瘤組織的熒光探針系統及其制備方法。

背景技術

目前在臨床上常規診療方法有血液學檢查、醫學影像學檢查等，其中醫學影像學在現代腫瘤醫學檢查中扮演著十分重要的角色。隨著醫學影像學檢測技術的革新和迅猛發展，如多排螺旋CT儀器，可精確到一個斷層1毫米對人體進行全方位的掃描，還可仿真內鏡檢查，使早期發現小組織腫瘤成為現實。而以¹¹C、¹³N、¹⁵O、¹⁸F等正電子核素為示蹤劑的PET-CT檢測手段在一定意義上被稱為靶向性檢測，放射治療腫瘤可殺死腫瘤細胞，但大劑量的輻射也會造成組織器官的破壞、壞死。因此應用核素檢測腫瘤會給人機體帶來一定的風險，有些腫瘤病人，在經歷了漫長的放射治療后，或是做多次后續性輻射檢查，由于體內的核素不能及時代謝出體外，當輻射劑量累積到一定程度時，很容易引起機體細胞組織再次癌變。

腫瘤診斷研究的不斷發展伴隨著多種顯像技術的不斷引進，其中熒光成像技術也越來越成為研究熱點。動物模型已經廣泛應用于基礎和臨床前研究，結合熒光成像技術能夠更精確地指導腫瘤模型動物實驗，成為腫瘤診斷的一種非常有價值的工具。目前熒光成像越來越多的用于監測體內分子的行為，成像運用的范圍從細胞、組織水平發展到全身水平，并有可能用于臨床研究。近期分子影像學的許多發展已經使人們對活體內特異分子作用靶點和分子作用路徑有了更直觀形象的認識。介于分子成像技術的快速發展，研究者將其運用到了體內更多的生理病理特征變化的檢測中，在腫瘤的相關研究中，不僅能使臨床研究者直觀地診斷腫瘤位于身體的哪個位置，還能檢測到特異性的分子(如朊酶類和蛋白激酶類)的功能和活性，以及反映腫瘤治療過程中的生物學變化(如細胞凋亡、血管生成和腫瘤轉移)。熒光成像技術將在腫瘤的研究中發揮越來越大的作用，它對腫瘤的診斷、個體化治療、藥物的研發和腫瘤發生機理的研究和應用都有巨大的意義。

熒光光學成像是醫學影像技術中的重要技術之一，當今熒光成像特別是近紅外染料越來越多的用于監測體內分子的行為，成像運用的范圍從細胞、組織水平發展到全身水平，并有可能用于臨床研究。近年來隨著分子影像學的不斷發展，熒光光學活體成像使人們直觀觀察到以體內特異分子作為靶點的直接效應，同時對分子作用途徑也有了更加深刻地認識。大多數熒光染料在體內半衰期較短，且對腫瘤組織沒有特異性，因此可將熒光染料結合一些“導向性基團”并用生物相容性材料脂質體制備成納米靶向性熒光探針，以增加生物相容性，延長熒光染料在體內的半衰期，并具有一定的靶向性，如將具有靶向性熒光分子探針注入體內，通過體內的熒光信號強度診斷腫瘤的早期組織。

現有技術缺點之一：所用材料PLGA雖然已被FDA批準上市，但由PLGA所制備的納米顆粒粒徑較大并分散性差，無靶向性，使納米顆粒多集中于肺部和肝部，很難鎖定腫瘤部位。

缺點之二：目前在臨床上輔助手術的示蹤劑是注射吲哚熒光染料菁綠ICG,用于診斷肝硬化、肝纖維化、韌性肝炎、職業和藥物中毒性肝病等各種肝臟疾病，了解肝臟的損害程度及其儲備功能。用于脈絡膜血管造影，確定脈絡膜疾患的位置，但對腫瘤組織無特異性靶向，且在全身分散。臨床所開發的靶向性熒光示蹤劑多為主動靶向性熒光探針，在眾多主動靶向研究中，較成熟的主動靶向小分子配體葉酸具有較好的靶向性，但腎臟大量表達葉酸受體，因此由葉酸靶向的小分子藥物和探針會聚集在腎臟引起腎毒性，葉酸共價偶聯藥物和探針的腎聚集是限制葉酸靶向性藥物和探針在臨床上使用的最大障礙，此問題一直沒有被解決。

前期研究工作中，制備2-氨基葡萄糖-FITC熒光探針和2-氨基葡萄糖-ICG02近紅外熒光探針，從細胞水平和動物水平研究熒光探針的靶向性。實驗結果證明已成功合成2-氨基葡萄糖-谷氨酸-熒光染料FITC/近紅外熒光探針，細胞和動物實驗表明在葡萄糖轉運蛋白受體-配體作用的介導下，2-氨基葡萄糖熒光探針可靶向葡萄糖轉運蛋白受體高表達的腫瘤細胞和組織。將2-氨基葡萄糖共價偶聯熒光染料，制備小分子熒光探針，具有較好靶向性。2-氨基葡萄糖熒光探針的制備及腫瘤靶向性的研究已發表在《中國臨床藥理學與治療學》2016，12.

缺點之一：一個小分子探針只能共價偶聯2個氨基葡萄糖分子，

缺點之二：小分子探針在體內循環較快，且熒光染料在體內容易發生熒光淬滅現象。

發明內容