[發明專利]分子印跡攪拌棒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711230617.2
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN109839452B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 唐吉旺
• 申請（專利權）人: 湖南省產商品質量監督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008
• 代理人: 黃麗

本發明公開了一種分子印跡攪拌棒及其制備方法和應用，該分子印跡攪拌棒包括表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒和覆于玻璃攪拌棒上的分子印跡涂層，制備方法包括將克倫特羅溶解于甲醇中，加入甲基丙烯酸，聚合后加入二甲基丙烯酸乙二醇酯和偶氮二異丁腈混合并超聲，將玻璃攪拌棒置于混合溶液中在氮氣氣氛和水浴加熱下反應，形成分子印跡涂層，得到分子印跡攪拌棒。該分子印跡攪拌棒可用于檢測動物源性食品中的β?受體激動劑類藥物，有利于簡化檢測步驟，降低基質干擾，提高檢測效率、檢測準確度及靈敏度，對環境友好，具有良好的科研價值、實際運用價值及發展前景。

技術領域

本發明屬于分析化學及檢測領域，涉及一種分子印跡固相微萃取技術及應用，具體涉及一種分子印跡攪拌棒及其制備方法和應用。

背景技術

β-受體激動劑是一類化學合成的苯乙醇胺類物質，能顯著增加動物的瘦肉率、增重和提高飼料轉化，進而降低成本。人食用β-興奮劑含量較高的動物組織后，會出現肌肉顫動、肌痛，甚至惡心、頭暈目眩等中毒癥狀，嚴重者危及生命。農業部235號公告《動物性食品中獸藥最高殘留限量》規定在所有動物源性食品中不得檢出此類藥物。國外，歐盟也頒布了一系列的法規，規定了動物組織中克倫特羅的MRL。但β-受體激動劑類藥物種類繁多，臨床應用且可獲取的有20多種。部分不法商販為了獲取更大經濟利益，同時逃避政府監管和法律處罰，在動物養殖過程中非法使用其它β-受體激動劑類藥物，這給動物養殖過程以及動物源性食品中β-受體激動劑類藥物的常規檢測和日常監管帶來極大挑戰。因此，研究建立β-受體激動劑類藥物高通量、高靈敏度的篩選技術和確證方法，為提高檢測效率、改進監控手段提供技術支撐，對于監控飼料、養殖環節和動物產品中β-受體激動劑類藥物的使用具有重要的意義。

目前，飼料、動物性食品以及生物材料中β-受體激動劑類藥物分析方法主要有免疫篩選方法和儀器確證方法。免疫篩選方法包括酶聯免疫法(ELISA)和膠體金試紙條等。該方法的優點是操作簡便、篩選速度快、便于在線實時分析和移動分析，缺點是定量不夠準確或造成假陽性和假陰性的定性分析結果。儀器分析方法有液相色譜(LC)、毛細管電泳(CE)、氣相色譜-質譜(GC-MS)和液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)等。其中，LC-MS/MS作為一種檢測靈敏度高，應用范圍廣，可靠性強的檢測平臺被廣泛的應用于飼料、動物組織、毛發、血液以及動物尿液中β-受體激動劑及其代謝產物的測定。儀器檢測的主要優點是分析結果精確度高，缺點是操作技術要求高，對于生物樣品基質需要復雜的前處理。在質譜分析過程中，樣品基質效應對確證分析結果的準確性和精密度的影響仍然是一個巨大挑戰。因此，樣品前處理技術的研究在β-受體激動劑的檢測中占據非常重要的地位。

樣品前處理方法研究已成為當今分析化學的前沿課題之一。現代分析科學所面臨的樣品趨于復雜化，對樣品前處理技術提出了嚴峻挑戰，要求前處理方法具有高選擇性、快速簡單、無溶劑或少溶劑等。傳統的樣品前處理方法，如液液萃取、索氏提取、柱層析等都需要使用較多的有機溶劑且操作繁瑣，固相萃取(Solid phase extraction，SPE)雖可以很好的濃縮和凈化樣品，但處理復雜生物樣品中的痕量組分時選擇性不高。

固相微萃取技術(Solid phase micro-extraction，SPME)是一種將分析物高效萃取富集于微體積的聚合物或有機溶劑中，集采樣、萃取、濃縮、進樣于一體的無(少)溶劑、易于與其它技術在線聯用的樣品前處理方法。分子印跡聚合物(Molecularly imprintedpolymers，MIP)是指將待分離的目標分子與功能單體通過共價或非共價作用進行預組裝，再與交聯劑共聚得到的聚合物。除去目標分子后，聚合物中形成與目標分子空間互補并具有預定作用位點的“空穴”，因此對目標分子的空間結構有“記憶”效應，能夠高選擇性地識別復雜樣品中的印跡分子。分子印跡固相微萃取技術(MIP-SPME)是將分子印跡聚合物的穩定性好、選擇性高的特點與固相微萃取技術集于一體，實現了復雜樣品中結構類似化合物的選擇性分離與富集。這種微萃取技術一經提出便得到了快速發展，現已有纖維固相微萃取、管內固相微萃取和攪拌棒吸附萃取等不同形式。