[發明專利]分子印跡攪拌棒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201711230617.2
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN109839452B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 唐吉旺
• 申請（專利權）人: 湖南省產商品質量監督檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008
• 代理人: 黃麗

1.一種分子印跡攪拌棒在檢測動物源性食品中β-受體激動劑類藥物中的應用，其特征在于，所述應用包括以下步驟：采用三氯乙酸對動物源性食品樣品中的待測目標物進行提取，提取溶液經調pH值為9～10后，加氯化鈉混勻，用體積比為6∶4的異丙醇-乙酸乙酯混合液將待測目標物提取富集，氮吹濃縮后，用萃取溶劑溶解殘渣，然后將分子印跡攪拌棒置于所得樣品溶液中，在攪拌下對待測目標物進行吸附萃取，最后用解析溶劑將待測目標物解析下來供高效液相色譜串聯質譜測定；

高效液相色譜串聯質譜測定的參數如下：

色譜柱：aQ柱，流動相：溶劑A為體積分數0.1%的甲酸水溶液，溶劑B為乙腈；梯度洗脫程序：0～1 min，90% A～40%A，1～4 min，40%A～5%A，4～5 min，5%A，5.0～5.1 min，5%A～90%A，5.1～7.0 min，90%A，流速：0.3 mL/min；柱溫：35 ℃；進樣量：10 μL；

離子源：電噴霧電力離子源；掃描方式：正離子掃描；輔助氣壓力：10 Arb；鞘氣壓力：40Arb；離子噴霧電壓：3500 V；霧化器溫度：300 ℃；離子源溫度：350 ℃；碰撞氣氬氣壓力：1.5 mtorr；檢測方式：多反應監測掃描模式，其它質譜分析參數如下：

所述萃取溶劑為甲苯，所述解析溶劑為體積比為9∶1的甲醇-乙酸混合液或體積分數為10%的乙酸溶液，所述吸附萃取的時間為15 min～120 min，所述解析 的時間為5 min～30min，所述攪拌的速度為100 r/min～800 r/min，所述吸附萃取的溫度為室溫～60 ℃；

所述待測目標物包括克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、溴布特羅、特布他林和馬布特羅，

當β-受體激動劑類藥物為克倫特羅時，線性方程為y=10124+2.65×10⁶ x，線性范圍為0.5～35 μg/L，

當β-受體激動劑類藥物為沙丁胺醇時，線性方程為y=20563+1.05×10⁶ x，線性范圍為1～35 μg/L，

當β-受體激動劑類藥物為萊克多巴胺時，線性方程為y=489612+2.96×10⁶ x，線性范圍為1～35 μg/L，

當β-受體激動劑類藥物為溴布特羅時，線性方程為y=52461+2.35×10⁶ x，線性范圍為1～35 μg/L，

當β-受體激動劑類藥物為特布他林時，線性方程為y=89764+1.89×10⁶ x，線性范圍為1～35 μg/L，

當β-受體激動劑類藥物為馬布特羅時，線性方程為y=78456+1.03×10⁶ x，線性范圍為1～35 μg/L；

所述分子印跡攪拌棒包括攪拌棒和覆于攪拌棒上的分子印跡涂層，所述分子印跡涂層主要以克倫特羅為模板分子、甲基丙烯酸為功能單體、二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯劑、甲醇為致孔劑、偶氮二異丁腈為引發劑制成分子印跡聚合物，然后將分子印跡聚合物中的模板分子洗脫后制備得到，所述攪拌棒為表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒；

所述分子印跡攪拌棒的制備方法包括以下步驟：

將模板分子克倫特羅溶解于甲醇中，加入功能單體甲基丙烯酸，經聚合后，加入交聯劑二甲基丙烯酸乙二醇酯和引發劑偶氮二異丁腈混合并超聲處理，得到混合溶液；將表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒置于所得混合溶液中，經再次超聲后，在氮氣氣氛和水浴加熱條件下反應，在表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒上形成分子印跡涂層，得到分子印跡攪拌棒；

所述克倫特羅∶甲基丙烯酸∶二甲基丙烯酸乙二醇酯∶甲醇∶偶氮二異丁腈的添加比例為0.5 mmol∶2 mmol∶8 mmol∶5 mL∶15 mg；

所述水浴加熱的溫度為70 ℃，所述反應的時間為24 h～36 h。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述吸附萃取的時間為60 min，所述解析的時間為10 min，所述攪拌的速度為300 r/min，所述吸附萃取的溫度為室溫。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述聚合的時間為12 h～24 h，所述超聲處理的時間為10 min～15 min，所述再次超聲的時間為5 min～10 min。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒的制備過程為：先用NaOH溶液浸泡含鐵芯玻璃攪拌棒，以最大程度的暴露出含鐵芯玻璃攪拌棒表面的硅醇基，然后用蒸餾水沖洗，再浸泡于鹽酸溶液中除去含鐵芯玻璃攪拌棒表面殘留的堿液，再用蒸餾水沖洗并干燥，將干燥后的含鐵芯玻璃攪拌棒浸泡于3-（異丁烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷的丙酮溶液中使其表面硅烷化，經甲醇清洗和氮氣流吹干后，得到表面硅烷化的含鐵芯玻璃攪拌棒。