[發明專利]一種用于檢測腸腺病毒的引物、探針和試劑盒

在審

• 申請號: 201711230467.5
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN108004348A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 石康;朱玉華;劉映樂;朱世新
• 申請（專利權）人: 湖北朗德醫療科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103
• 代理人: 成鋼

本發明公開了一種用于檢測腸腺病毒的引物、探針和試劑盒，屬于生物技術領域。所述引物和探針包括：用于檢測腸腺病毒的正向引物、用于檢測腸腺病毒的反向引物和用于檢測腸腺病毒的探針。所述試劑盒包括上述的引物和探針。所述引物、探針和試劑盒，具有靈敏度高的特性，能夠準確檢測樣品是否感染腸腺病毒。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別涉及一種用于檢測腸腺病毒的引物、探針和試劑盒。

背景技術

腺病毒是一種常見的病毒感染，有許多不同的臨床表現，有時臨床癥狀很獨特，可以作明確的診斷，然而大多數的病例，腺病毒引起的癥狀很難跟其它病原引起的作區分。腺病毒最常造成呼吸道及腸胃道的感染。

1981年以來，國外Kidd、Takiff等最早從腹瀉病人糞便中分離出腸道型腺病毒(EAD)，以后DeTong用限制性內切酶分析EAD，發現其有兩種不同電泳圖譜，名為Ad-40及Ad-41。腺病毒胃腸炎廣泛分布于全世界，檢出率為5％～14％，其中Ad-40和Ad-41占70％左右。

腺病毒胃腸炎的最小發病年齡為1個月，絕大多數發生于3歲以下的嬰幼兒。Ad-40主要感染1歲左右嬰兒，Ad-41則感染稍大的幼兒，全年均可發病，但腺病毒性胃腸炎一般呈散發性。

腺病毒胃腸炎的潛伏期約10天，主要表現為腹瀉，量少或多，呈水樣便或稀便，少數患者可排出粘液，病程4～8天，常伴嘔吐。部分患者有呼吸道癥狀，少數患者發熱，病程多自限，排毒時間約1周。某些患者失水較嚴重，個別重度失水者可死亡。

由于對這一病毒的致病作用不夠重視，尚無常規細胞培養。診斷本病雖可采用DNA限制性內切酶檢測法，但此法有一定局限性，不易推廣。有人認為采用聚丙烯胺凝膠電泳法既能檢測Ad，又可檢測糞便中輪狀病毒，敏感度高于電鏡。

對腺病毒性胃腸炎的治療主要是對癥治療，可口服世界衛生組織推薦的口服補液鹽，必要時給予靜脈補液。

發明內容

為了解決現有技術中抗體檢測不準確的問題，本發明實施例提供了一種用于檢測腸腺病毒的引物、探針和試劑盒。所述技術方案如下：

一方面，本發明實施例提供了一種用于檢測腸腺病毒的引物和探針，所述引物和探針包括：用于檢測腸腺病毒的正向引物、用于檢測腸腺病毒的反向引物和用于檢測腸腺病毒的探針，其中，

所述用于檢測腸腺病毒的正向引物如序列表中SEQ ID NO.1所示；

所述用于檢測腸腺病毒的反向引物如序列表中SEQ ID NO.2所示；

所述用于檢測腸腺病毒的探針如序列表中SEQ ID NO.3所示；

所述探針的5’端連接有熒光基團FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5，所述探針的3’端連接有淬滅基團TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。

另一方面，本發明實施例提供了一種用于檢測腸腺病毒的試劑盒，所述試劑盒包括上述的引物和探針。

具體地，所述試劑盒還包括：核酸釋放劑、PCR反應液、臨界陽性質控品、陽性質控品、陰性質控品和工作標準品。

具體地，所述工作標準品包括：工作標準品1、工作標準品2、工作標準品3和工作標準品4，其中，

所述工作標準品1為1×107拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段；

所述工作標準品2為1×106拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段；

所述工作標準品3為1×105拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段；