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[發明專利]一種用于檢測腸腺病毒的引物、探針和試劑盒在審

專利信息
申請號: 201711230467.5 申請日: 2017-11-29
公開(公告)號: CN108004348A 公開(公告)日: 2018-05-08
發明(設計)人: 石康;朱玉華;劉映樂;朱世新 申請(專利權)人: 湖北朗德醫療科技有限公司
主分類號: C12Q1/70 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103 代理人: 成鋼
地址: 443000 湖北省*** 國省代碼: 湖北;42
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 用于 檢測 病毒 引物 探針 試劑盒
【權利要求書】:

1.一種用于檢測腸腺病毒的引物和探針,其特征在于,所述引物和探針包括:用于檢測腸腺病毒的正向引物、用于檢測腸腺病毒的反向引物和用于檢測腸腺病毒的探針,其中,

所述用于檢測腸腺病毒的正向引物如序列表中SEQ ID NO.1所示;

所述用于檢測腸腺病毒的反向引物如序列表中SEQ ID NO.2所示;

所述用于檢測腸腺病毒的探針如序列表中SEQ ID NO.3所示;

所述探針的5’端連接有熒光基團FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX、Cy3或Cy5,所述探針的3’端連接有淬滅基團TAMRA、Eclipse、BHQ1、BHQ2、BHQ3或DABCYL。

2.一種用于檢測腸腺病毒的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括如權利要求1所述的引物和探針。

3.根據權利要求2所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括:核酸釋放劑、PCR反應液、臨界陽性質控品、陽性質控品、陰性質控品和工作標準品。

4.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述工作標準品包括:工作標準品1、工作標準品2、工作標準品3和工作標準品4,其中,

所述工作標準品1為1×107拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段;

所述工作標準品2為1×106拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段;

所述工作標準品3為1×105拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段;

所述工作標準品4為1×104拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段。

5.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述陽性質控品為1.0×106拷貝/mL的所述腸腺病毒的T抗原基因片段。

6.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述正向引物和所述反向引物的終濃度均為0.05-0.9μM,所述探針的終濃度為0.05-0.9μM。

7.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述PCR反應液各組分在PCR 擴增反應體系中包括:終濃度為0.01U/μL~0.05U/μL的Taq酶、終濃度為0.2~0.6mM的dNTPs、10×PCR緩沖液和終濃度為1.5~5.0mM的含Mg離子的溶液。

8.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述核酸釋放劑包括無菌水、終濃度為0.03-0.3%的聚乙二醇辛基苯基醚、終濃度為0.04-0.4%的壬基酚聚氧乙烯(40)醚和pH值為8.3的終濃度為0.01-0.1M的三(羥甲基)氨基甲烷。

9.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述臨界陽性質控品為1.0×104拷貝/mL的所述腸腺病毒的基因片段。

10.根據權利要求3所述的試劑盒,其特征在于,所述陰性質控品為濃度為0.8%的生理鹽水。

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