[發明專利]用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201711226529.5
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107746884B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 陳愛亮;趙杰;楊曙明;李婷婷
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: C12Q1/6858
• 分類號: C12Q1/6858;C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 史晶晶

本發明涉及溯源檢測領域，具體而言，涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品、試劑盒及方法。該方法使用如上所述的試劑盒對待檢樣本的DNA依次進行AFLP酶切與連接反應、連接產物的預擴增以及對預擴增產物的選擇性擴增，并檢測AFLP的選擇性擴增產物。能夠便利、精確地進行肉牛的個體及品種鑒定，進一步用于個體及品種的溯源，保證食品安全。

技術領域

本發明涉及溯源檢測領域，具體而言，涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品、試劑盒及方法。

背景技術

近年，在肉類市場經常出現仿冒品牌、仿冒產地，利用低價值產品冒充高價值產品的現象，不僅擾亂了市場秩序，侵犯了消費者權益，而且還可能因為過敏等問題導致消費者的健康風險。我國雖已實施了肉類產品的可追溯管理和應用體系，但是由于主要是以動物佩戴電子耳標和條碼技術進行溯源和管理。一方面電子耳標易脫落，造成信息的缺失，另一方面，動物屠宰后耳標與胴體分開，僅依靠條碼技術，難以保證產品信息的真實性。因此需要開發一種行之有效的方法對市場上的牛肉來源進行鑒別與溯源。

擴增片段長度多態性技術(Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP)通過選擇性擴增基因組DNA的酶切片段，由于不同基因組DNA的酶切位點存在差異，因而產生了擴增片段長度的多態性，進而可以將不同的動物品種甚至個體及品種加以區分開。AFLP兼具RFLP技術的可靠性及PCR技術的高效性，有可同時對多位點進行檢測、重復性好、信息量大、符合孟德爾遺傳的特點，非常適合動物個體及品種的鑒定應用方面。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的在于提供一種AFLP引物組合產品，包含該引物產品的試劑盒以及基于該試劑盒的肉牛個體及品種鑒定方法，以解決上述問題。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

本發明涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品，其包含選自下列的序列中的至少兩條：SEQ ID NO:1～8所示核苷酸序列。

根據本發明的一方面，本發明還涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的試劑盒，所述試劑盒包含如上所述的引物組合產品、限制性內切酶、接頭序列以及預擴增引物。

根據本發明的一方面，本發明還涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的方法，包括：

使用如上所述的試劑盒對待檢樣本的DNA依次進行AFLP酶切與連接反應、連接產物的預擴增以及對預擴增產物的選擇性擴增，并檢測AFLP的選擇性擴增產物。

本發明所提供的用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品、試劑盒及方法，能夠便利、精確地進行肉牛的個體及品種鑒定，進一步用于肉牛個體及品種的溯源，保證食品安全。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明具體實施方式或現有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發明的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為實施例2中AFLP引物組合對于肉牛品種的鑒定效果注：A-安多牦牛，HN-日本和牛，LM-利木贊牛，JX-郟縣紅牛，N-南陽黃牛，LX-魯西黃牛。

具體實施方式

本發明涉及一種用于肉牛個體及品種鑒定的AFLP引物組合產品，其包含選自下列的序列中的至少兩條：SEQ ID NO:1～8所示核苷酸序列。

優選的，如上所述的引物組合產品，其包含選自下列的引物對中的一對或多對：