[發明專利]一種火麻種子誘導愈傷組織的方法

有效

• 申請號: 201711224773.8
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107912301B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 農艷豐;李健;朱德生
• 申請（專利權）人: 百色學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張雪

本發明屬于生物技術領域，具體公開了一種火麻種子誘導愈傷組織的方法。本發明火麻種子誘導愈傷組織的方法包括以下步驟：(1)預處理：采用超聲波對火麻種子進行處理；(2)消毒處理：依次采用酒精和升汞處理火麻種子剝去種皮后得到的火麻仁；(3)接種培養：將上述經過消毒處理的火麻仁接種于誘導培養基中培養，即得火麻愈傷組織。本發明火麻種子誘導愈傷組織的方法利用火麻的種子作為外植體進行組織培養誘導愈傷組織，誘導率高且誘導得到的愈傷組織質量好，為火麻種子的后續培養分化獲得大量健壯組培苗提供了基礎。

【技術領域】

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種火麻種子誘導愈傷組織的方法。

【背景技術】

火麻，又稱為線麻和汗麻等，是桑科火麻屬一年生草本植物。火麻籽去皮后為火麻仁，火麻仁中含有多種營養物質，如維生素B、維生素E、樹脂、揮發油等成分。火麻仁富含油脂，其油脂油含量為30％，高于大豆的脂肪油含量，不飽和脂肪酸占70％-80％，主要為亞油酸，亞麻酸及油酸，含量分別為0.61％，24.42％，52.32％，其中亞油酸和亞麻酸的比例接近2.5，為人體攝取脂肪酸的最佳比例。其中，不飽和脂肪酸有抗氧化、抗腫瘤、增強免疫力的作用，可以明顯降低高密度蛋白血清膽固醇的含量，從而降低心臟病、中風、高血壓等疾病的發病率，而亞麻酸含量對高血壓、動脈粥樣硬化等心血管疾病有較好的防治作用。因此，火麻具有較高的營養價值和保健價值。

目前，火麻的繁殖技術主要以種子繁殖，即有性繁殖為主，存在種子發芽率低、催芽時間長且發芽不一致、產生變異的可能性大等缺點，以上問題嚴重阻礙了火麻的規模化生產，無法滿足市場對火麻的需求。

【發明內容】

本發明的發明目的在于：針對上述存在的問題，提供一種火麻種子誘導愈傷組織的方法。本發明火麻種子誘導愈傷組織的方法利用火麻的種子作為外植體進行組織培養誘導愈傷組織，誘導率高且誘導得到的愈傷組織質量好，為火麻種子的后續培養分化獲得大量健壯組培苗提供了基礎。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

一種火麻種子誘導愈傷組織的方法，包括以下步驟：

(1)預處理：挑選完整飽滿、大小均一的火麻種子，用流水沖洗后，采用超聲波處理20min，并將火麻種子保持浸泡在介質中30-50min，其中，處理前10min的介質為40-45℃的水，處理后10min的介質為GGR溶液；將超聲波處理后的火麻種子放入鋪有濕布的培養皿中，再蓋上一層濕布后，于25℃下放置8-10h；

(2)消毒處理：將上述經過預處理的火麻種子剝去種皮后得火麻仁，用流水將所述火麻仁沖洗10-20min后，用體積分數為70％-75％的酒精處理15-30s，再用無菌水沖洗3次，再用質量分數為0.1％的升汞處理8-11min，最后用無菌水沖洗3次；

(3)接種培養：將上述經過消毒處理的火麻仁接種于誘導培養基中培養，即得火麻愈傷組織；所述誘導培養基的組成為：在MS培養基中添加2.0-2.3mg/L的2,4-D、0.1-0.3mg/L的6-BA、1-2mg/L的GGR和0.1-0.2mg/L的GA₃。

進一步的，步驟(1)中，所述超聲波的功率為100-120W、頻率為30KHz。

進一步的，步驟(1)中，所述GGR溶液的質量濃度為25-35mg/L。

進一步的，步驟(2)中，所述無菌水沖洗的時間為60-70s/次。

進一步的，步驟(3)中，所述培養過程為：暗培養3-6d后轉光照培養，光照時間12-14h/d，光照強度為1500-1800lx。

進一步的，步驟(3)中，所述誘導培養基的組成為：在MS培養基中添加2.1mg/L的2,4-D、0.2mg/L的6-BA、1.3mg/L的GGR和0.1mg/L的GA₃。