[發(fā)明專利]一種火麻種子誘導(dǎo)愈傷組織的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711224773.8
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107912301B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 農(nóng)艷豐;李健;朱德生
• 申請（專利權(quán)）人: 百色學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張雪

1.一種火麻種子誘導(dǎo)愈傷組織的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)預(yù)處理：挑選完整飽滿、大小均一的火麻種子，用流水沖洗后，采用超聲波處理20min，并將火麻種子保持浸泡在介質(zhì)中30-50min，其中，處理前10min的介質(zhì)為40-45℃的水，處理后10min的介質(zhì)為GGR溶液；將超聲波處理后的火麻種子放入鋪有濕布的培養(yǎng)皿中，再蓋上一層濕布后，于25℃下放置8-10h；

(2)消毒處理：將上述經(jīng)過預(yù)處理的火麻種子剝?nèi)シN皮后得火麻仁，用流水將所述火麻仁沖洗10-20min后，用體積分?jǐn)?shù)為70％-75％的酒精處理15-30s，再用無菌水沖洗3次，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的升汞處理8-11min，最后用無菌水沖洗3次；

(3)接種培養(yǎng)：將上述經(jīng)過消毒處理的火麻仁接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，即得火麻愈傷組織；所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為：在MS培養(yǎng)基中添加2.0-2.3mg/L的2,4-D、0.1-0.3mg/L的6-BA、1-2mg/L的GGR和0.1-0.2mg/L的GA₃；

步驟(1)中，所述超聲波的功率為100-120W、頻率為30KHz；

步驟(1)中，所述GGR溶液的質(zhì)量濃度為25-35mg/L；

步驟(2)中，所述無菌水沖洗的時間為60-70s/次；

步驟(3)中，所述培養(yǎng)過程為：暗培養(yǎng)3-6d后轉(zhuǎn)光照培養(yǎng)，光照時間12-14h/d，光照強(qiáng)度為1500-1800lx；

步驟(3)中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為：在MS培養(yǎng)基中添加2.1mg/L的2,4-D、0.2mg/L的6-BA、1.3mg/L的GGR和0.1mg/L的GA₃ 。