[發明專利]一種活性小球藻多糖的制備方法

在審

• 申請號: 201711223977.X
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN107880144A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 全盈園
• 申請（專利權）人: 金華市鐵騎士生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京華仲龍騰專利代理事務所(普通合伙)11548
• 代理人: 李靜

技術領域

本發明涉及天然活性成分領域，特別涉及一種活性小球藻多糖的制備方法。

背景技術

海洋覆蓋著地球的表面積，廣闊的海洋面積及其特殊的環境，導致了海洋生物物種的多樣性遠遠超過了陸地生物物種多樣性。海洋微生物種類及資源是不可估量的，種類繁多。與陸地環境相比，由于海洋高壓、高鹽、低溫特別是深海或局部高溫、寡營養、無光照等特殊生活環境，使海洋微生物不僅以其獨特的生物代謝方式在極端的生態環境中得以生存，而且還可以產生與陸地微生物不同的活性代謝產物。特殊環境微生物是在特殊的生境或極端的環境下形成的具有特殊功能或特殊構造與組分的生物資源，它擁有特殊的基因及其表達產物或性狀，是人類尚未充分開發利用的珍貴遺傳資源寶庫，也是獲取豐富微生物多糖的寶貴資源。因此，海洋微生物多糖獨特的化學結構和生物活性研究受到廣泛關注。近年來，海洋微生物多糖的結構及生物活性研究取得了顯著進展。真菌多糖作為多糖研究領域中的一個重要分支，因其獨特的生物活性而引起越來越多的關注。近年來，已有大量關于真菌多糖生物活性的研究報道，主要集中在抗腫瘤、免疫調節、抗突變、抗病毒、降血脂、降血糖、抗氧化、抗輻射和抗潰瘍等方面。

小球藻屬于綠藻門（Chlorophyta）綠球藻目（Chlorococcales）卵囊藻科（Oocysteceae）小球藻屬（Chlorella），是一種廣泛分布的海洋微藻。小球藻中富含多糖類成分，其多糖的生物活性多樣，具有很高的抗腫瘤和降血糖活性，可促進脾淋巴細胞及腹腔巨噬細胞的增殖，成為人們研究的重點。

現有技術如授權公告號為CN 103880971 B的中國發明專利，公開了一種小球藻水不溶性多糖提取的方法，該方法包括原料的處理、酶法提取、分離、濃縮、醇沉、干燥等工藝。該多糖原料來源豐富、廉價，可來源于小球藻產油后的殘渣，而且方法工藝簡單、生產成本低廉，是一種有效提升小球藻高附加值和綜合利用率的方法。但是該提取方法的提取效率低，得到的小球藻多糖活性較低。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提取方法簡單可行，機械化操作成度高，提取效率高，耗時短，小球藻多糖的提取率高、活性高，易于工業化規模生產，具有良好的應用價值和市場潛力的活性小球藻多糖的制備方法。

本發明針對上述技術中提到的問題，采取的技術方案為：

一種活性小球藻多糖的制備方法，包括超聲波破碎、小球藻粗多糖制備、酶解法-Sevage法除蛋白、多糖修飾，其具體步驟為：

超聲波破碎：按料液比為1:8-12將小球藻粉和水混合均勻，再加入8-氯茶堿，在超聲波功率為500-520MPa的條件下超聲波破碎8-15min，然后置于轉速為7000-9000r/min的離心機中離心8-15min，留下上清液，備用，8-氯茶堿為脫脂小球藻粉的重量的0.22-0.33‰，8-氯茶堿能提高小球藻粉在水中的分散性，避免團聚現象的發生，使得超聲微波能更好地作用于小球藻粉，提高小球藻的破壁率，同時在小球藻多糖提取時能讓提取出來的多糖快速溶于水中，縮短了提取時間，減少能源消耗，最終提高小球藻的提取效果和小球藻多糖的得率，該步驟利用超聲波對小球藻進行破壁，超聲波能夠在局部產生強大的高速射流，從而大大增加了傳質效率，讓細胞內部的多糖等活性物質更加快速完全地釋放了出來，具有快速、操作簡單、節能、高效等特點；

小球藻粗多糖制備：將超聲波破碎步驟得到的上清液的pH調至9.5-10.2，然后在溫度為65-75℃下提取3-5h，然后置于轉速為3000-5000r/min的離心機中離心8-15min，上清液即為小球藻粗多糖溶液，備用，破碎后的多糖提取率整體高于直接水提的多糖提取率，提取的溫度、pH都小于直接水提，大大降低了小球藻多糖提取時所消耗的能源，且能夠保護小球藻多糖的螺旋結構不被破壞，進而保持多糖的活性，具有很大的發展前景；