[發明專利]一種白菊的離體快速繁殖培養方法

有效

• 申請號: 201711220512.9
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN108040872B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 李涵;曹樺;瞿素萍;田敏;陸琳;王繼華
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所;玉溪澄花生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京隆達恒晟知識產權代理有限公司 11899
• 代理人: 楊青

本發明涉及一種白菊的離體快速繁殖培養方法，屬于植物組織培養技術領域，本發明選取外植體的滅菌處理，通過愈傷組織誘導、不定芽誘導、不定芽增值、壯苗培養、生根培養和煉苗移栽后，得到白菊的完整植株；本發明通過對仙女杯屬白菊的組織培養誘導研究，建立了白菊的組織培養快繁體系，具有誘導效率高、增殖系數高、根系發達、移栽成活率高、生長周期短等特點，大大提高了白菊的育苗效率，增加白菊的繁殖方法，為多肉植物白菊的研究和開發利用提供理論數據，為白菊種苗產業化、市場化提供技術支持。

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體的說，涉及一種白菊的離體快速繁殖培養方法。

背景技術

白菊，又名格瑞內（Dudleya greenei），為景天科仙女杯屬多肉植物，葉片無毛，生長在蓮座基部，葉片顏色通常從綠色至灰色，觀賞價值較高。原產墨西哥及美國，現世界多地可栽培。白菊喜溫暖干燥和陽光充足環境，不耐寒，耐半陰和干旱，怕水濕和強光暴曬，夏天有休眠期。需要接受充足日照葉色才會艷麗，株型才會更緊實美觀。日照太少則葉色淺，葉片排列松散，拉長。

目前，白菊無法葉插繁殖，只能采用播種與砍頭進行繁殖，繁殖方式單一，種源稀少，繁殖速度較慢。播種繁殖難于維持母株的優良性狀，砍頭繁殖影響母株的美觀效果，兩種繁殖方式都存在很大的局限性，造成市場價值較高，非常不利于白菊的種植推廣。

發明內容

為了克服背景技術中存在的問題，本發明提供了一種白菊的離體快速繁殖培養方法，建立了白菊的組織培養快繁體系，增加白菊的繁殖方法，為多肉植物白菊的研究和開發利用提供理論數據，為白菊種苗產業化、市場化提供技術支持。

為實現上述目的，本發明是通過如下技術方案實現的：

所述的白菊的離體快速繁殖培養方法，具體包括以下步驟：

（1）外植體的滅菌處理：選取外植體用自來水清洗表面的贓物，流水沖洗30min-40min，在超凈工作臺上用75%酒精侵泡30s，無菌水清洗3-4次，再用0.1%升汞滴入2滴吐溫消毒6-10min，期間不時振蕩，無菌水沖洗4-5次，用無菌濾紙吸干水分，切去切口消毒受傷的部分；

（2）愈傷組織誘導：將步驟（1）得到的消毒后的外植體接種于愈傷組織誘導培養基MS+0.5-1 .0mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.1-0.5mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，誘導培養3-5d后外植體基部開始萌動膨大，培養 7-14d 后基部周圍形成團狀愈傷組織；

（3）不定芽誘導：將步驟（2）誘導形成的愈傷組織切割成0.4-0.8cm大小的切塊，接種到不定芽誘導培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.05-0.1mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，誘導培養5-7d后愈傷組織開始分化形成不定芽；

（4）不定芽增殖：將步驟（3）得到的不定芽分割成2-4株為一叢，接種到增殖培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.05-0.2mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養30-40d后，增殖3-5倍；

（5）壯苗培養：將步驟（4）得到的增殖苗分割成2-3株為一叢，接種到壯苗培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.1-0.3mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養40-50d后，形成1.5-2cm的小苗株；

（6）生根培養：將步驟（5）中得到的小苗株分割成單株接種到生根培養基MS+0.05-0.1mg/L6-BA+0.5-1.0mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養30-40d后，得到生根苗；