[發明專利]一種白菊的離體快速繁殖培養方法

有效

• 申請號: 201711220512.9
• 申請日: 2017-11-29
• 公開（公告）號: CN108040872B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 李涵;曹樺;瞿素萍;田敏;陸琳;王繼華
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院花卉研究所;玉溪澄花生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京隆達恒晟知識產權代理有限公司 11899
• 代理人: 楊青

1.一種白菊Dudleya greenei的離體快速繁殖培養方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

（1）外植體的滅菌處理：外植體為白菊Dudleya greenei的側芽，選取外植體用自來水清洗表面的贓物，流水沖洗30min-40min，在超凈工作臺上用75%酒精浸泡30s，無菌水清洗3-4次，再用0.1%升汞滴入2滴吐溫消毒6-10min，期間不時振蕩，無菌水沖洗4-5次，用無菌濾紙吸干水分，切去切口消毒受傷的部分；

（2）愈傷組織誘導：將步驟（1）得到的消毒后的外植體接種于愈傷組織誘導培養基MS+0.5-1 .0mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.1-0.5mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，誘導培養3-5d后外植體基部開始萌動膨大，培養 7-14d 后基部周圍形成團狀愈傷組織；

（3）不定芽誘導：將步驟（2）誘導形成的愈傷組織切割成0.4-0.8cm大小的切塊，接種到不定芽誘導培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.01-0.1mg/LNAA+0.05-0.1mg/LKT+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，誘導培養5-7d后愈傷組織開始分化形成不定芽；

（4）不定芽增殖：將步驟（3）得到的不定芽分割成2-4株為一叢，接種到增殖培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.05-0.2mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養30-40d后，增殖3-5倍；

（5）壯苗培養：將步驟（4）得到的增殖苗分割成2-3株為一叢，接種到壯苗培養基MS+0.2-0.6mg/L6-BA+0.1-0.3mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養40-50d后，形成1.5-2cm的小苗株；

（6）生根培養：將步驟（5）中得到的小苗株分割成單株接種到生根培養基MS+0.05-0.1mg/L6-BA+0.5-1.0mg/LNAA+20-30g/L糖+7g/L瓊脂中，pH值為5.8-6.0，培養30-40d后，得到生根苗；

（7）煉苗移栽：將步驟（6）得到的生根苗移到溫室內馴化5-7d，然后取出苗洗凈植株根系附著培養基，用50%多菌靈可濕性粉劑800倍～1000倍全株浸泡10 min，取出放置于陰涼處晾干水分，栽植于基質中，遮光70-80%，保持通風，相對濕度60-80%；栽植2周后逐漸增加光照；3-4周后，植株開始生長，發新根，得到白菊Dudleya greenei完整植株。

2.根據權利要求1所述的一種白菊Dudleya greenei的離體快速繁殖培養方法，其特征在于：步驟（2）-步驟（6）中，培養條件為溫度20±2℃、光照強度3000～5000lx、光照15h/d，相對濕度 50-60％。

3.根據權利要求1所述的一種白菊Dudleya greenei的離體快速繁殖培養方法，其特征在于：步驟（7）中，生根苗放置于陰涼處晾干水分至苗輕微萎焉。

4.根據權利要求1所述的一種白菊Dudleya greenei的離體快速繁殖培養方法，其特征在于：步驟（7）中，所述基質包括腐殖土、蛭石、珍珠巖，其比例為1：1：1。

5.根據權利要求1所述的一種白菊Dudleya greenei的離體快速繁殖培養方法，其特征在于：步驟（7）中，生根苗栽植于基質后，每周噴施一次1/4MS營養液和0.1%多菌靈。