[發(fā)明專利]一種乙酰基四肽-2的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711218826.5
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN107722107B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王萬科;張忠旗;郭添;王昕;常剛;高長波;王斌;楊小琳;趙金禮
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西慧康生物科技有限責任公司
• 主分類號: C07K5/11
• 分類號: C07K5/11;C07K1/16;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責任公司 61201
• 代理人: 高雪霞

本發(fā)明公開了一種乙酰基四肽?2的制備方法，該方法將Fmoc?L?m?Tyr?OH與叔丁基二甲基氯硅烷、N,N二異丙基乙胺進行反應(yīng)合成Fmoc?L?m?Tyr(TBDMS)?OH，然后在Rink?Amid?AM Resin上依次連接Fmoc?L?m?Tyr(TBDMS)?OH、Fmoc?Val?OH、Fmoc?Asp(OtBu)?OH、Fmoc?D?Lys(Boc)?OH，經(jīng)脫保護、切割得乙酰基四肽?2產(chǎn)品。本發(fā)明將固相合成與液相合成相結(jié)合，先通過液相合成方法合成Fmoc?L?m?Tyr(TBDMS)?OH，再通過經(jīng)典固相合成法合成乙酰基四肽?2，既有降低成本、易于操作的優(yōu)點，又有經(jīng)典固相法合成效率高、操作簡單的特點，是一種相對理想的乙酰基四肽?2合成方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化妝品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種乙酰基四肽-2的制備方法。

背景技術(shù)

乙酰基四肽-2是一種四個氨基酸組成的活性多肽，其序列為Ac-D-Lys-Asp-Val-L-m-Tyr-NH₂，是由胸腺生成素II的氮端(AA33～36)衍生而來的四個氨基酸肽鏈，其可以刺激角質(zhì)細胞的生長和分化，可以有效加強皮膚免疫防御和促進表皮再生，增強皮膚系統(tǒng)免疫力。因此，多用于化妝品內(nèi)開發(fā)抗衰老美容產(chǎn)品。

目前，有關(guān)乙酰基四肽-2的制備使用經(jīng)典的固相合成方法，由于使用的保護氨基酸產(chǎn)品Fmoc-L-m-Tyr(tBu)-OH價格昂貴，所以合成成本很高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種簡單易行、成本較低的乙酰基四肽-2的制備方法。

解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案由下述步驟組成：

1、合成Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-OH

(1)合成Fmoc-L-m-Tyr-OH

以水和乙腈的混合液為溶劑，將L-m-Tyr-OH、芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺、三乙胺在室溫下進行反應(yīng)，反應(yīng)完后用鹽酸調(diào)節(jié)pH5，濃縮除去乙腈，用硫酸氫鉀水溶液和乙酸乙酯萃取，對乙酸乙酯相進行濃縮，濃縮液用石油醚結(jié)晶并淋洗過濾，得到Fmoc-L-m-Tyr-OH。

(2)合成Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-OH

以乙腈為溶劑，將Fmoc-L-m-Tyr-OH、叔丁基二甲基氯硅烷、N,N-二異丙基乙胺在室溫下進行反應(yīng)，反應(yīng)完成后用硫酸氫鉀水溶液調(diào)節(jié)pH5，濃縮除去乙腈，用硫酸氫鉀水溶液和用乙酸乙酯萃取，對乙酸乙酯相進行濃縮，濃縮物柱層析純化，得到Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-OH。

2、合成Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin

以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑，將Rink Amid-AM Resin、Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-OH、1-羥基苯并三唑、N,N-二異丙基碳二亞胺在室溫下進行反應(yīng)，得到Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin。

3、合成Fmoc-Val-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin

將步驟2得到的Fmoc-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin用哌啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液脫除Fmoc保護基，得到H₂N-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin；以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑，將H₂N-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin、Fmoc-Val-OH、1-羥基苯并三唑、N,N-二異丙基碳二亞胺在室溫下進行反應(yīng)，得到Fmoc-Val-L-m-Tyr(TBDMS)-Rink Amide-AM Resin。