[發明專利]一種測定性激素結合蛋白含量的試劑盒及其測試方法

在審

• 申請號: 201711217126.4
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN108226515A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 丁建華;劉振世;沈怡;張譽嚴
• 申請（專利權）人: 泰州澤成生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 黃冠華

本發明公開了一種采用磁微粒化學發光法測定人血清中性激素結合蛋白(SHBG)含量的試劑盒。試劑盒包括校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；其中抗試劑異硫氰酸熒光素標記的性激素結合蛋白包被抗體和堿性磷酸酶標記的性激素結合蛋白標記抗體；磁微粒試劑為磁微粒與羊抗FITC連接物。本發明將化學發光技術與免疫磁微粒相結合，提供了一種接近均相的反應體系，并且采用了一步法反應模式，使得檢測靈敏度、精密性大大提高、檢測范圍擴大，反應時間大大縮短，從開始加樣到檢測結果，時間少于25min,明顯快于同類試劑盒；并且可以在全自動化學發光儀上同時測定多個樣本，實現性激素結合蛋白的高通量快速化測定，準確度高，特異性強，精確度和檢測效率有了較大的提高。

技術領域

本發明涉及生物化學技術領域，具體涉及一種采用磁微粒化學發光法測定人體中性激素結合蛋白(SHBG)含量的試劑盒。

背景技術

性激素結合蛋白(SHBG)一種負責為睪酮和雌二醇進行血液傳輸的糖蛋白。SHBG是在肝臟中合成的，它與睪酮和5-二氫-睪酮結合時親和力很高，而與雌二醇結合時親和力略低。在結合型睪酮中，44％-60％與SHBG結合；雌激素在血循環中約95％與特異的SHBG相結合。

在臨床癥狀上顯示女性多毛癥及男性化SHBG含量在女性多毛癥及男性化疾病中，僅為正常值的50％，而游離T含量則幾乎增加90％。故在這類疾病中SHBG測定不僅可作為診斷指標，而且可以作為衡量治療效果的依據。多囊卵巢綜合征(PCOS)、肥胖、甲狀腺機能低下SHBG水平下降。在有肝臟疾病(肝硬化、慢性肝炎、脂肪肝)的患者體內可以看到升高的SHBG水平，口服避孕藥和抗癲癇要也能導致SHBG水平升高。

目前已知的性激素結合蛋白測定方法有放射免疫法(RIA)、酶聯免疫吸附法(ELISA)、膠乳增強比濁法等。放射免疫法步驟繁瑣，試劑價格昂貴，需使用配套的儀器且存在放射性污染。酶聯免疫吸附法存在檢測時間長、操作復雜、重復性差、不適于急診和臨床病人及時診斷的需要。膠乳增強免疫比濁法操作簡單、快速，但是靈敏度低、低值重復性差。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術的缺陷，提供一種準確度高的采用磁微粒化學發光法測定人血清中性激素結合蛋白(SHBG)含量的試劑盒。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一種測定性激素結合蛋白含量的試劑盒，包括校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；

所述磁微粒試劑是將抗異硫氰酸熒光素抗體與羧基磁珠偶聯制成，所述發光底物是將ALPS溶解于發光底物緩沖液中制成；

分別配制校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物；將校準品、質控品、抗試劑、磁微粒試劑、發光底物，獨立地置于包裝容器內，得到性激素結合蛋白的定量測定試劑盒；

(一)、所述校準品、質控品的配制，包括以下步驟：

用校準品緩沖溶液溶解性激素結合蛋白抗原，配制抗試劑的校準品和質控品；其中，所述校準品緩沖溶液是通過在1L的新生牛血清中加入0.01g～0.05g的四環素和0.1g～0.5g的硫酸新霉素，完全溶解后經過0.22μm濾膜處理制備而成；

(二)、所述抗試劑的配制：

1)抗試劑緩沖液的制備：

將10g～20g的Na₂PO₃H·12H₂O、1～2g的NaPO₃H₂·12H₂O、1g～5g的綿羊血清、3g～10g的新生牛血清、1g～5g的馬血清加入1L純化水中，充分攪拌至完全溶解，用4M HCl調節pH至5～6，制得所述抗試劑緩沖液；