[發(fā)明專利]一種冬蟲夏草的種植方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201711215825.5
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN107980472A
• 公開（公告）日: 2018-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃有強
• 申請（專利權(quán)）人: 藤縣友強淮山種植專業(yè)合作社
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00
• 代理公司: 北京元本知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所11308
• 代理人: 曹廣生

1.一種冬蟲夏草的種植方法，其特征在于：培養(yǎng)基配方包括玉米250克、蛋白胨25克、酵母粉2.5克、磷酸二氫鉀2.5克、維生素B15片、鏈霉素2.5克、硫酸鎂1克、葡萄糖40克、水2500毫升；

配制方法：將玉米用清水洗凈放入鍋內(nèi)加水2500毫升煮沸30分鐘，冷卻后用四層紗布過濾去渣，取其汁液于鍋中，加蛋白胨25克、酵母粉2.5克、磷酸二氫鉀2.5克、維生素B15片、鏈霉素2.5克、硫酸鎂1克、葡萄糖40克，然后加熱至全部溶化，冷卻后分裝在500毫升鹽水瓶內(nèi)，每瓶裝液量250毫升，用棉塞塞緊封口后在高壓鍋內(nèi)滅菌，溫度達到121℃時保壓2小時出鍋，冷卻后連同冬蟲夏草二級母種斜面一同放入無菌箱中，準備轉(zhuǎn)接；

菌種分離，采新鮮蟲草菌核，在無菌條件下，進行表面消毒后用無菌水沖洗，后用解剖刀分成小塊，接種子斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基成分為蛋白胨10g，葡萄糖40g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g，雞蛋黃1g，維生素B1溶液20ml，瓊脂20g，水1000ml，pH自然。置于26℃溫度條件下，約15d可發(fā)出形似青霉的蟲草菌。蝙蝠蛾幼蟲的飼養(yǎng)與接菌，斜面菌種培養(yǎng)基用玉米粉、蔗糖、瓊脂各20g，加入水1000ml，pH自然，在25℃下約7d即可轉(zhuǎn)接一級搖瓶；

液體菌種的培養(yǎng)，轉(zhuǎn)接過程中嚴格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，轉(zhuǎn)接過程是將斜面試管中已長成的冬蟲夏草母種轉(zhuǎn)接到液體培養(yǎng)基中，接種時，要去掉母種塊上的瓊脂，使母種塊漂浮在鹽水瓶中的液體培養(yǎng)液上面，接種后放到恒溫箱里在25℃，恒溫培養(yǎng)3天，待液體菌種培養(yǎng)液面上的母種塊長到直徑為2.5cm的菌塊時，就將鹽水瓶轉(zhuǎn)移到搖瓶機上在20-28℃振蕩培養(yǎng)10天，得冬蟲夏草液體菌種；搖瓶和發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方為玉米粉2％(煮沸30min，用紗布過濾取汁)，蔗糖2％，蛋白胨1％，酵母粉0.5％，磷酸二氫鉀0.1％，硫酸鎂0.05％；

搖瓶培養(yǎng)用500ml三角瓶裝培養(yǎng)基100～150ml，接入斜面菌種，在搖床培養(yǎng)，150r/min，于25℃下振蕩4d即可長好，可繼續(xù)用1000ml或5000ml三角瓶擴大培養(yǎng)至需用液量，即可轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)；

用500L發(fā)酵罐，投料300L，接種量10％，溫度24～26℃，罐壓29.4～49.1kPa(0.3～0.5kg/c㎡)，攪拌速度180r/min，用菜子油消泡，培養(yǎng)90～120h，菌絲濃度不再增加，即可終止發(fā)酵。冬蟲夏草菌體發(fā)酵液，置于濃縮罐內(nèi)，其真空濃度為79.5kPa(600mmHg)，蒸發(fā)量為300kg/h，溫度62℃，真空減壓濃縮至原液體積的1/5，濃縮完畢，將提取物制成膏或膠囊入藥。