[發明專利]基于pH控制的多拉菌素發酵生產方法

有效

• 申請號: 201711215737.5
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN107723325B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 王守奎;王欣榮;王洛菊;褚以文;張效軍;翟龍飛;張新宜
• 申請（專利權）人: 山東齊發藥業有限公司
• 主分類號: C12P19/62
• 分類號: C12P19/62
• 代理公司: 北京智橋聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 11560
• 代理人: 洪余節

1.一種基于pH控制的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，包括以下步驟：采用的菌種為阿維鏈霉菌Streptomyces avermitilis ATCC 53568；在多拉菌素產生菌初級代謝階段,通過基礎培養基使得菌絲快速生長，pH不予控制；發酵補前體：將環己甲酸配制成鈉鹽，共計補入0.18wt%的環己甲酸鈉鹽，發酵罐培養第40hr時，加入0.08wt%的環己甲酸；發酵罐培養第110-130hr時，加入0.05wt%環己甲酸；發酵罐培養第210hrs-220hrs時加入0.05wt%環己甲酸；在次級代謝階段通過補加生理堿性鹽，流加第一碳源控制pH在6.7-7.0范圍內；所述生理堿性鹽選自磷酸三鎂、磷酸三鎂水合物、醋酸鉀和醋酸鈉中的一種以上；所述第一碳源選自糊精和麥芽糊精中的一種以上。

2.根據權利要求1所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，所述基礎培養基含有磷酸鹽和第二碳源。

3.根據權利要求1所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于,在次級代謝階段，相對每升發酵液，所述生理堿性鹽的添加量為不大于3克/L，所述第一碳源的添加量為30-60克/L。

4.根據權利要求2所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，所述磷酸鹽選自磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸三鎂、磷酸三鎂水合物中的一種以上。

5.根據權利要求2所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，所述第二碳源選自淀粉、葡萄糖、麥芽糖、糊精、麥芽糊精中的一種以上。

6.根據權利要求2所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，每升所述基礎培養基中，所述磷酸鹽的含量為2-9克，所述第二碳源的含量為90-110克。

7.根據權利要求1所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，每升所述基礎培養基中還包含黃豆餅粉5-20克、棉籽餅粉5-20克、碳酸鈣1-5克、氯化鈉0.5-1.5克、消泡劑0.6-1.0克，余量為水。

8.根據權利要求1所述的多拉菌素發酵生產方法，其特征在于，在初級代謝階段和次級代謝階段的培養條件均為：培養溫度27.5-29.5℃，攪拌轉速80-220rpm，空氣流量1:0.5-0.8vvm。