[發(fā)明專利]一種免疫活性花生肽的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711211919.5
• 申請(qǐng)日: 2017-11-28
• 公開（公告）號(hào): CN107723329B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李向陽(yáng);吳澎;代養(yǎng)勇;陳建省;張慧;趙路蘋;丁秀臻;張小村
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P21/06
• 分類號(hào): C12P21/06;C12P39/00;C12P21/00;A23L5/20;C12R1/125;C12R1/865;C12R1/01
• 代理公司: 濟(jì)南譽(yù)豐專利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 李茜

本發(fā)明公開了一種免疫活性花生肽的制備方法，包括下述步驟：（1）以冷榨花生粕和熱榨花生粕為原料，并對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理；（2）將預(yù)處理后的原料進(jìn)行半干法一次酶解，得到酶解液1；（3）將酶解液1進(jìn)行微生物一次發(fā)酵；（4）將一次發(fā)酵后的原料平均分成三份，分別加入無(wú)花果蛋白酶、堿性蛋白酶和中性蛋白酶進(jìn)行同步二次酶解，得到酶解液2；（5）向酶解液2中加入復(fù)合蛋白酶，進(jìn)行三次酶解，酶解后滅酶，得到酶解液3；（6）將酶解液3進(jìn)行微生物二次發(fā)酵；發(fā)酵液經(jīng)超濾分離、脫色、濃縮與干燥，即得到高免疫活性花生肽。本發(fā)明能有效提高產(chǎn)品的免疫活性，有效去除黃曲霉毒素，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及花生深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種免疫活性花生肽的制備方法。

背景技術(shù)

花生是中國(guó)重要的油料作物之一，產(chǎn)量居世界首位，年產(chǎn)量約1700萬(wàn)噸。在我國(guó)，有少量花生被直接食用，或被制作成花生醬、炒制花生果等花生休閑食品，有大約50％-60％的花生被采用冷榨或熱榨等方式制取花生油，制油后產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物花生粕。由于冷榨方式制取的花生油油香不足，且油提取率低，因此我國(guó)的花生粕多以熱榨花生粕為主，而熱榨工藝使得花生蛋白熱變性嚴(yán)重，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與功能特性均受到不同程度的影響，目前熱榨花生粕大都作為動(dòng)物飼料處理，產(chǎn)品附加值低，資源浪費(fèi)嚴(yán)重。

花生粕內(nèi)富含蛋白質(zhì)，含量約40-50％?；ㄉ鞍字懈缓梭w必須氨基酸，具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。然而，花生蛋白的溶解性、起泡性、可吸收性較差，又具有一定的致敏性，很大程度限制了其在食品工業(yè)中的應(yīng)用。將花生蛋白改性形成的小分子肽，具有良好的溶解性、起泡性、可吸收性，而且致敏性低，比蛋白質(zhì)和氨基酸更易消化吸收，能增強(qiáng)肌肉和體能，能促進(jìn)肌細(xì)胞復(fù)原，能幫助機(jī)體消除疲勞，快速恢復(fù)體力，可作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)原料，應(yīng)用于食品、保健品及特殊醫(yī)療配方食品中，因此，研發(fā)具有高生理活性的花生肽意義重大。

制備花生肽的方法主要有三類：一是通過(guò)化學(xué)試劑改性花生蛋白制備；二是通過(guò)酶法水解花生蛋白制備；三是通過(guò)微生物發(fā)酵花生蛋白制備。由于通過(guò)化學(xué)試劑改性技術(shù)制備，環(huán)境污染嚴(yán)重，現(xiàn)已很少采用。微生物發(fā)酵及酶法水解花生蛋白制備花生肽，因其技術(shù)簡(jiǎn)單、安全、高效，目前被廣泛采用。在微生物發(fā)酵及酶法水解工藝中，發(fā)酵菌種的選擇、發(fā)酵條件的確定及酶種類、酶解條件的確定至關(guān)重要，這些將直接影響花生肽產(chǎn)品的氨基酸組成、風(fēng)味及生物活性。已公開專利及文獻(xiàn)中均采用單因素及正交實(shí)驗(yàn)、響應(yīng)面分析法等確定酶解花生蛋白最佳酶種類及酶解條件，工作量大，重復(fù)實(shí)驗(yàn)多，程序復(fù)雜。發(fā)酵方法普遍采用固態(tài)發(fā)酵或液態(tài)發(fā)酵對(duì)花生粕進(jìn)行發(fā)酵。另外，已公開專利及文獻(xiàn)中制備花生肽采用的花生粕原料大都為冷榨花生粕，熱榨花生粕利用較少，同步以冷榨、熱榨花生粕為原料制備高免疫活性花生肽未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是提供一種免疫活性花生肽的制備方法。

本發(fā)明所提供的免疫活性花生肽的制備方法，包括下述步驟：

(1)以冷榨花生粕和熱榨花生粕為原料，并對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理；

(2)將預(yù)處理后的原料進(jìn)行半干法一次酶解，得到酶解液1；

(3)將酶解液1進(jìn)行微生物一次發(fā)酵，發(fā)酵溫度為30-50℃，發(fā)酵時(shí)間為1-9天；

(4)將一次發(fā)酵后的原料平均分成三份，分別加入無(wú)花果蛋白酶、堿性蛋白酶和中性蛋白酶進(jìn)行同步二次酶解，酶解時(shí)間為3-6h；同步二次酶解結(jié)束后離心，收集上清液，將三份酶解液的上清液混合，40-60℃繼續(xù)酶解1-9h，酶解結(jié)束后滅酶，得到酶解液2；

(5)向酶解液2中加入復(fù)合蛋白酶，進(jìn)行三次酶解，酶解后滅酶，得到酶解液3；

(6)將酶解液3進(jìn)行微生物二次發(fā)酵，發(fā)酵溫度為30-50℃，發(fā)酵時(shí)間為3-6天；發(fā)酵液經(jīng)超濾分離、脫色、濃縮與干燥，即得到高免疫活性花生肽。