[發明專利]一種免疫活性花生肽的制備方法

有效

• 申請號: 201711211919.5
• 申請日: 2017-11-28
• 公開（公告）號: CN107723329B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 李向陽;吳澎;代養勇;陳建省;張慧;趙路蘋;丁秀臻;張小村
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C12P39/00;C12P21/00;A23L5/20;C12R1/125;C12R1/865;C12R1/01
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 李茜

1.一種免疫活性花生肽的制備方法，其特征在于，包括下述步驟：

（1）以冷榨花生粕和熱榨花生粕為原料，并對原料進行預處理；

（2）將預處理后的原料進行半干法一次酶解，得到酶解液1；

（3）將酶解液1進行微生物一次發酵，發酵溫度為30-50℃，發酵時間為1-9天；

（4）將一次發酵后的原料平均分成三份，分別加入無花果蛋白酶、堿性蛋白酶和中性蛋白酶進行同步二次酶解，酶解時間為3-6h；同步二次酶解結束后離心，將三份酶解液的上清液混合，40-60℃繼續酶解1-9h，酶解結束后滅酶，得到酶解液2；

（5）向酶解液2中加入復合蛋白酶，進行三次酶解，酶解后滅酶，得到酶解液3；

（6）將酶解液3進行微生物二次發酵，發酵溫度為30-50℃，發酵時間為3-6天；發酵液經超濾分離、脫色、濃縮與干燥，即得到高免疫活性花生肽；

步驟（1）中，原料預處理的方法為：將冷榨花生粕和熱榨花生粕晾曬、烘干后以等質量比混合，粉碎，過30-70目篩，然后以10-30cm厚度鋪開，依次紫外輻照10-60min，脈沖強光輻照10-60s；

步驟（2）中，半干法一次酶解的方法為：將預處理后的原料隔水蒸煮30-60min，降溫至40-70℃后向原料中加入纖維素酶和高溫淀粉酶，攪拌均勻，恒溫3-12h后再次隔水蒸煮60-180min，冷卻至35-50℃；

步驟（3）中，微生物一次發酵所采用的發酵微生物為：以等比例混勻的面包酵母、納豆菌和枯草芽孢桿菌；發酵微生物加入的質量分數為1-10%；

步驟（4）中，無花果蛋白酶的加入質量分數為1-5%，在60-70℃，pH4-8的條件下進行酶解；堿性蛋白酶加入的質量分數為1-5%，在40-60℃，pH7-9的條件下進行酶解；中性蛋白酶加入的質量分數為1-5%，在40-60℃，pH5-8的條件下進行酶解；

步驟（5）中，所述復合蛋白酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、胰蛋白酶等比例混合；所述復合蛋白酶的加入質量分數為1-10%；

步驟（5）中，三次酶解的pH為5-8，溫度為40-60℃，酶解時間為1-9h；

步驟（6）中，微生物二次發酵所采用的發酵微生物為枯草芽孢桿菌；枯草芽孢桿菌加入的質量分數為1-10%。

2.權利要求1所述的方法制備得到的花生肽。

3.權利要求2所述的花生肽在制備增強免疫力的藥品或保健品中的應用。