[發明專利]一種用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法

在審

• 申請號: 201711207544.5
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN108048527A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發明（設計）人: 萬君興;華子昂;孫寧;竹添;劉松潔;王嬌;薛志杰
• 申請（專利權）人: 華子昂
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12Q1/6888;G06F19/24
• 代理公司: 銀川長征知識產權代理事務所 64102
• 代理人: 陳曉慶

1.一種用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：所述方法是以柴達木福牛的全基因組DNA為模板，利用CAPN3基因標記進行PCR擴增獲得PCR擴增產物，將獲得的PCR擴增產物進行測序，最后對所檢測到的基因進行分型和對比分析，即針對CAPN3基因5‘UTR的C2546T位點進行PCR擴增及測序，最后對所檢測結果進行統計分析。

2.根據權利要求1所述的用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：包括如下步驟：

1)采集柴達木福牛靜脈血進行全基因組DNA提取，然后利用瓊脂糖電泳及ND2000進行質量、濃度和純度的檢測；

2)以提取的全基因組DNA為模板，對CAPN3基因5‘UTR區進行PCR擴增，獲得PCR擴增產物；

3)將PCR擴增產物通過瓊脂糖凝膠電泳檢測后，再用測序儀進行測序，根據檢測結果將所有個體按照基因型進行分類；

4)數據分析：對不同基因型個體的肉質及體尺性狀中的剪切力、pH、屠宰率、眼肌面積、活體重、胴體重進行統計分析。

3.根據權利要求2所述的用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：步驟2)中所述PCR擴增的引物序列為：引物序列為：CATCAACAGCTACGAGATGCG(上游引物)，GGTCATATAGTAAGGTCAGT(下游引物)。

4.根據權利要求2所述的用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：步驟2)中所述PCR擴增的反應體系包括含5umol/LMg2+的Buffer，10umol/L dNTPs，10umol/L上、下游引物，模板DNA，5U.uL Taq DNA聚合酶和超純水。

5.根據權利要求2所述的用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：步驟2)中所述PCR擴增的反應程序為：95℃預變性5min；94℃變性30S，60℃退火30S，72℃延伸20S，36個循環；72℃延伸7min。

6.根據權利要求2所述的用CAPN3基因進行柴達木福牛標記輔助選擇的方法，其特征在于：步驟3)中所述檢測結果中顯示存在一個SNP位點，所有個體按照基因型分為：CC型、CT型和TT型。

7.如權利要求1～6中任一權利要求所述的CAPN3基因在柴達木福牛肉質預測方面的應用。