[發明專利]一種基于液晶生物傳感器檢測天蠶素B的方法

有效

• 申請號: 201711204561.3
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN107941712B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 蘇秀霞;徐佳;張婧;張姣;霍文靜;胡金龍;晏春苗;張海寧
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: G01N21/21
• 分類號: G01N21/21;G01N33/531
• 代理公司: 西安西達專利代理有限責任公司 61202
• 代理人: 劉華

1.一種基于液晶生物傳感器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)玻片的預處理

將玻片切割成所需大小，用新配制的Piranha溶液于80℃充分浸泡，再分別用乙醇和去離子水清洗干凈，經N₂吹干，干燥，防塵備用；

2)玻片的組裝

2-1)上玻片的DMOAP溶液組裝：將經過步驟1)預處理的玻片浸入DMOAP水溶液中，用體積分數0.2%的DMOAP水溶液浸泡30min，充分浸泡后，用超純水沖洗干凈，N₂吹干，干燥，防塵備用；

2-2)下玻片的TEA和DMOAP混合溶液組裝：將經過步驟1)預處理的玻片浸入50℃的TEA:DMOAP體積比為2:1的醋酸-醋酸鈉溶液中，用含體積分數2%TEA且含體積分數1%DMOAP的溶液在50℃下恒溫2h，使基底表面存在功能化的自組裝膜，充分浸泡后，用超純水沖洗干凈，N₂吹干，干燥，防塵備用；

3)天蠶素B的固定

取適量的天蠶素B溶液滴加至下玻片表面，用洗耳球吹開，于37℃溫育2.5h，取出后分別用PBS緩沖液和超純水沖洗，除去未固定的天蠶素B分子，N₂吹干，冷凍保存；固定化天蠶素B濃度為100ng/ml；

4)天蠶素B抗原抗體競爭免疫反應

將一定濃度的天蠶素B抗體溶液與不同濃度的天蠶素B溶液37℃恒溫混勻10min后滴加至固定有抗原的玻片上，用洗耳球吹開，于37℃溫育1.5h，抗原抗體即可實現免疫競爭反應；分別用PBS緩沖液和超純水沖洗，N₂吹干備用；

5)液晶池的制作

液晶池由上玻片和下玻片面對面組裝而成，玻片之間用Mylar聚酯片隔開，Mylar聚酯片中間開凸型空腔，除開孔方向外，其它三邊邊緣用小夾子固定；先將液晶5CB加熱到40℃使其呈各向同性的液態，然后將其從Mylar聚酯片開孔處注入并通過毛細管作用力布滿整個空腔，自然冷卻到28℃，用偏光顯微鏡觀察其光學現象。