[發(fā)明專利]一種雞冠花無性快繁方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711200956.6
• 申請日: 2017-11-27
• 公開（公告）號: CN109832190A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發(fā)明（設計）人: 陳向陽;李海飛
• 申請（專利權）人: 廣西北流森藝瓷業(yè)有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南寧深之意專利代理事務所(特殊普通合伙) 45123
• 代理人: 黃南概

1.一種雞冠花無性快繁方法，其特征在于：包括外植體處理、誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)，選取雞冠花子株作為外植體，對外植體進行洗凈滅菌消毒處理后，接種于誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得雞冠花愈傷組織，再將雞冠花愈傷組織轉接至增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，最后將分化出的長1-2cm的叢生芽轉接到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)獲得生根雞冠花；主要包括如下步驟：

（1）外植體處理：選取雞冠花子株作為外植體，用純凈水沖洗外植體2-3次，然后在體積濃度0.1%代森鋅藍粉溶液中浸泡30-40min，用清水洗凈后用體積濃度0.15 % HgCl₂溶液對外植體浸泡15-20min進行滅菌消毒，最后用無菌水沖洗干凈外植體后，置于無菌濾紙上吸干水，備用；

（2）誘導培養(yǎng)：將步驟（1）處理后的雞冠花子株的莖段接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)，先暗培養(yǎng)3-4 d，然后光照培養(yǎng)，光照時間12h/d，光照強度500-1000lx，培養(yǎng)溫度22-28℃，培養(yǎng)時間20-22d，培養(yǎng)得到雞冠花愈傷組織；

（3）增殖培養(yǎng)：將步驟（2）中誘導得到的雞冠花愈傷組織轉接到增殖培養(yǎng)基中，光照時間10-12h/d，光照強度3000-3500lx，培養(yǎng)溫度22-28℃，培養(yǎng)時間20-25d，分化出芽；

（4）生根培養(yǎng)：將步驟（3） 中分化出的芽長至1-2cm的叢生芽轉接到生根培養(yǎng)基中，光照時間12h/d，光照強度1500-2000lx，培養(yǎng)溫度22-28℃，培養(yǎng)時間20-30d，得到生根雞冠花。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種雞冠花無性快繁方法，其特征在于：步驟（2）所述的誘導培養(yǎng)基的配方為：改良MS培養(yǎng)基+TDZ 3.0-5.0 mg/L+KT 2.0-3.0 mg/L +VC 15 mg/L +體積濃度0.1%高錳酸鉀溶液 +瓊脂粉3.6 g/L+蔗糖20 g/L。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種雞冠花無性快繁方法，其特征在于：步驟（3）所述的增殖培養(yǎng)基的配方為：改良MS培養(yǎng)基+TDZ 6.0-7.0 mg/L+KT 1.0-1.5 mg/L +VC 15 mg/L +體積濃度0.3%高錳酸鉀溶液 +瓊脂粉3.6 g/L+蔗糖20 g/L。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種雞冠花無性快繁方法，其特征在于：步驟（4）所述的生根培養(yǎng)基的配方為：改良MS培養(yǎng)基+NAA 3.0-5.0 mg/L+KT 2.0-3.0 mg/L +VC 15 mg/L +體積濃度0.5%高錳酸鉀溶液 +瓊脂粉3.6 g/L+蔗糖20 g/L。

5.根據(jù)權利要求2-4任一所述的一種雞冠花無性快繁方法，其特征在于：所述的改良MS培養(yǎng)基的配方為：所述的改良MS培養(yǎng)基的組成為：KNO₃ 1350 mg·L^-1；NH₄NO₃ 420 mg·L^-1；CaCl₂·2H₂O 260 mg·L^-1；MgSO₄·7H₂O 370 mg·L^-1；Ca(NO₃)₂·4H₂O 280 mg·L^-1；KH₂PO₄150 mg·L^-1；MnSO₄·H₂O 22.3 mg·L^-1；ZnSO₄·7H₂O 8.6 mg·L^-1；CuSO₄·5H₂O 0.025mg·L^-1；H₃BO₃ 6.2 mg·L^-1；Na₂MoO₄·2H₂O 0.025 mg·L^-1；KI 0.83 mg·L^-1；CoCl₂·6H₂O0.025 mg·L^-1；維生素B₁ 1.0 mg·L^-1；維生素B₆ 0.5 mg·L^-1；煙酸 0.5 mg·L^-1；甘氨酸2.0 mg·L^-1；肌醇 200 mg·L^-1。