[發明專利]測定動物膠類中藥中的四種硝基呋喃類藥物代謝產物殘留的方法

在審

• 申請號: 201711199087.X
• 申請日: 2017-11-26
• 公開（公告）號: CN108008038A
• 公開（公告）日: 2018-05-08
• 發明（設計）人: 勵炯;賈彥博;孫嵐;王紅青;林偉杰
• 申請（專利權）人: 杭州市食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

本發明公開了一種測定動物膠類中藥中的四種硝基呋喃類藥物代謝產物殘留的方法，包括以下步驟：制備待測樣品溶液；制備標準溶液；將標準系列工作溶液注入液質聯用儀，確定4種硝基呋喃類藥物代謝產物的出峰位置及其定性定量離子對，以定量離子對豐度為縱坐標，以濃度為橫坐標，制作標準曲線方程；將待測樣品溶液作相應檢測所得的數據代入標準曲線方程計算，得到待測樣品中各硝基呋喃類藥物代謝產物的含量。4種硝基呋喃類藥物代謝產物為：呋喃唑酮代謝物(AOZ)、呋喃它酮代謝物(AOMZ)、呋喃西林代謝物(SEM)、呋喃妥因代謝物(AHD)。

技術領域

本發明涉及一種適用于動物膠類中藥中的四種硝基呋喃類藥物代謝產物殘留的分散固相萃取結合通過式固相萃取凈化-超高效液相色譜-串聯質譜檢測法。

背景技術

硝基呋喃類藥物，是一類人工合成的抗生素，具有5-硝基呋喃母核機構，主要包括呋喃唑酮(FZD)、呋喃妥因(NFT)、呋喃西林(NFZ)、呋喃它酮(FTD)等。

硝基呋喃類藥物對細菌具有廣譜的抑制和殺滅作用，對大量革蘭氏陽性和陰性細菌、真菌、原蟲均有作用；硝基呋喃類藥物具有慢性毒性，可引起消化道反應，如惡心、嘔吐、厭食、腹瀉等，還可引起溶血性貧血和黃疸；長時間或大劑量使用硝基呋喃類藥物均能對動物體產生毒性作用，還具有致癌、致畸、致突變作用。2008年，美國環境保護署環境健康風險評估辦公室將呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因、呋喃它酮列入加利福利亞州65種致癌物名單(State of California Proposition 65Carcinogens List)。

硝基呋喃類藥物的代謝途徑大多相似，通常會在酶的作用下使呋喃開環形成丙烯腈衍生物，此衍生物再同谷胱甘肽(glutathione，GSH)、巰基乙醇、膜蛋白等進行可逆結合，在低pH環境下結合比較牢固。該結合物分別具有呋喃唑酮代謝物(AOZ)、呋喃它酮代謝物(AOMZ)、呋喃西林代謝物(SEM)、呋喃妥因代謝物(AHD)等的完整側鏈結構，在弱酸性環境下釋放這些側鏈結構，經過冷藏、(烘烤、油炸、微波)烹煮等處理后，這些小分子代謝物依然能維持穩定。

硝基呋喃類藥物，由于價格低廉和良好的抗菌效果，被廣泛應用與禽畜、水產養殖。雖然各國都對硝基呋喃類藥物在食用動物的使用作了嚴格的限定，但是該類藥物的濫用仍然屢禁不止。

動物膠類中藥是以動物的皮、角、甲或骨為原料，將其中的膠質煎至水中，以豆油、黃酒等為輔料，濃縮，干燥后制成的固體膠。膠體中藥含有較高含量的蛋白質，當動物原體喂以硝基呋喃類藥物時，硝基呋喃類藥物在動物體內的半衰期短，代謝速度快，其代謝產物能夠與組織蛋白質緊密結合，以結合態形式在體內殘留較長時間，甚至經過蒸煮、烘烤、磨碎和微波加熱也無法有效降解，且毒性更強，所以膠體中藥類中的硝基呋喃類藥物殘留問題尤其需要引起人們的注意。

目前，國內尚無相關動物膠類中藥中硝基呋喃類藥物代謝產物殘留的超高效液相色譜-串聯質譜檢測方法的相關報道。近年來，我國醫療模式正由“疾病治療”轉變為“疾病預防”，“治未病”的意識越來越為大眾所接受。因此，作為人們常用為滋補藥的膠類中藥，也隨之逐漸火熱，膠類中藥生產企業如雨后春筍般出現。目前，僅山東省內的膠類中藥生產企業就達上百家。其中，膠類中藥整個行業產品及膠類復方制劑有400余種，阿膠行業發展呈現出一派“蓬勃”景象。中藥膠劑是祖國傳統醫藥寶庫中重要的組成部分，使用歷史悠久，原料種類來源豐富、生產工藝繁復、臨床應用廣泛，且外觀性狀、組織特征和化學組成等與其他動物源食品相比，存在很大差異，對動物膠類中藥的硝基呋喃類藥物代謝產物殘留檢測問題就顯得非常棘手。本發明很好的解決了在檢測動物膠類中藥中硝基呋喃類藥物代謝產物殘留過程中的問題，為保障人類健康、提升企業自身技術發展水平、促進我國檢測技術的發展，提升我國膠類中藥質量安全檢測技術在國際上的地位，增加就業，帶動膠類中藥產業的全面進步，為技術的進步、產業的轉型升級都具有很大的經濟社會效益，研究動物膠類中藥中的四種硝基呋喃類藥物代謝產物殘留的分散固相萃取結合通過式固相萃取凈化-超高效液相色譜-串聯質譜檢測法具有重要的現實意義。

發明內容