[發明專利]一種靶向MAGE-A3的T細胞受體、T細胞受體基因修飾T細胞及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201711197369.6
• 申請日: 2017-11-25
• 公開（公告）號: CN109836490A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 張長風;吳詠東
• 申請（專利權）人: 深圳賓德生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/867;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;熊永強

本發明提供了一種靶向MAGE?A3的T細胞受體，所述靶向MAGE?A3的T細胞受體包括α鏈和β鏈，所述α鏈包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述β鏈包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。本發明還提供了一種靶向MAGE?A3的T細胞受體基因修飾T細胞。所述靶向MAGE?A3的T細胞受體基因修飾T細胞可以高效且特異性地殺傷MAGE?A3陽性癌細胞，具有持久的活力和殺傷力，并且對正常細胞不會造成損傷。本發明還提供了一種靶向MAGE?A3的T細胞受體基因修飾T細胞的制備方法和應用。

技術領域

本發明涉及醫學生物領域，特別涉及一種靶向MAGE-A3的T細胞受體、T細胞受體細胞及其制備方法和應用。

背景技術

惡性腫瘤是最為嚴重危害人類健康的疾病，每年中國大約三百萬人被診斷為新發腫瘤患者，二百萬人死于癌癥。人黑色素瘤抗原A3(melanoma antigen-A3，MAGE-A3)是黑色素瘤相關抗原家族中的一員。MAGE-A3總是與腫瘤相關，多表達于以黑色素瘤為主的惡性腫瘤組織中，在各種組織類型的腫瘤中均可呈高表達，如肺癌、乳腺癌、宮頸癌、胃癌、結-直腸癌、肝癌等，但不存在于正常細胞內。

近些年來，免疫細胞治療已經成為繼手術、放療、化療之后在惡性腫瘤治療中具有巨大前景的一種治療方法。免疫細胞治療具有特異性強、幾乎無毒副作用的巨大優勢彌補了傳統療法的弊端，在國內外已經用于臨床治療惡性腫瘤。T細胞受體(T cell receptor，TCR)基因修飾T細胞技術(TCR-T)為當前過繼性細胞回輸治療技術最新的免疫細胞技術之一，因其能夠在體內能激活自身免疫系統，持續性地靶向腫瘤細胞進行殺傷，最終達到清除惡性腫瘤細胞的目的而受到廣泛的關注和研究。然而，獲取到對腫瘤抗原高特異的、高親和性的T CR基因，以及TCR的亞基(例如α鏈與β鏈)間的正確配對仍是TCR-T技術面臨的挑戰。目前還未有靶向MAGE-A3的T細胞受體相關的制備和研究。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種靶向MAGE-A3的T細胞受體，以及包括所述靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞，所述靶向MAGE-A3的T細胞受體可以特異性識別的MAGE-A3，具有高親和性。所述靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞可以高效且特異性的殺傷MAGE-A3陽性癌細胞，具有持久的活力和殺傷力，并且對正常細胞不會造成損傷。本發明還提供了一種靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞的制備方法和應用。

第一方面，本發明提供了一種靶向MAGE-A3的T細胞受體，所述靶向MAGE-A3的T細胞受體包括α鏈和β鏈，所述α鏈包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述β鏈包括如SEQID NO：2所示的氨基酸序列。

其中，所述靶向MAGE-A3的T細胞受體(TCR-MAGE-A3)所包括的α鏈和β鏈可以形成穩定的異源二聚體結構，對MAGE-A3蛋白具有很強的特異性，不會靶向正常細胞或組織，增加了其安全性并減小了脫靶效應的風險。

其中，本發明所述TCR-MAGE-A3可以特異性識別并結合MAGE-A3蛋白，且具有最佳的靶點親和力。所述靶點親和力是指基因改造的TCR對于靶點(例如本發明中，TCR-MAGE-A3對MAGE-A3蛋白)的結合強度。靶點親和力對TCR的影響巨大，如果靶點親和力的結合強度過低，則無法誘導T細胞對癌細胞的特異性殺傷；反之，如果結合強度過高，則喪失特異性，T細胞會殺傷除了腫瘤細胞外的其他低表達TCR靶點的正常細胞(例如，一旦這些低表達的TCR靶點分布于心臟、大腦等重要器官中，會引起嚴重甚至致死性副作用)。

可選的，所述α鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述β鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列。