[發明專利]一種靶向MAGE-A3的T細胞受體、T細胞受體基因修飾T細胞及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201711197369.6
• 申請日: 2017-11-25
• 公開（公告）號: CN109836490A
• 公開（公告）日: 2019-06-04
• 發明（設計）人: 張長風;吳詠東
• 申請（專利權）人: 深圳賓德生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/725
• 分類號: C07K14/725;C12N15/12;C12N5/10;C12N15/867;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;熊永強

1.一種靶向MAGE-A3的T細胞受體，其特征在于，所述靶向MAGE-A3的T細胞受體包括α鏈和β鏈，所述α鏈包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述β鏈包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

2.如權利要求1所述的靶向MAGE-A3的T細胞受體，其特征在于，所述α鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述β鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列。

3.一種T細胞受體復合物，其特征在于，所述T細胞受體復合物包括α鏈和β鏈的一種或兩種，所述α鏈包括如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，所述β鏈包括如SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。

4.一種靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞，其特征在于，包括如權利要求1-2任一項所述的靶向MAGE-A3的T細胞受體。

5.一種重組病毒載體，其特征在于，所述重組病毒載體包括如權利要求1-2任一項所述的靶向MAGE-A3的T細胞受體的編碼基因。

6.如權利要求5所述的重組病毒載體，其特征在于，所述靶向MAGE-A3的T細胞受體的編碼基因序列包括從5’端到3’端順次連接的α鏈、2A肽和β鏈的基因序列，所述α鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述β鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列，所述2A肽的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列。

7.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞包括如權利要求5-6任一項所述的重組病毒載體。

8.一種靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)提供靶向MAGE-A3的T細胞受體TCR-MAGE-A3的基因序列，包括從5’端到3’端順次連接的α鏈、2A肽和β鏈的基因序列，所述α鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述β鏈的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列，所述2A肽的編碼基因序列包括如SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列；

(2)將所述TCR-MAGE-A3的基因序列插入到pLenti載體中，得到pLenti-TCR-MAGE-A3重組質粒；

(3)將所述pLenti-TCR-MAGE-A3重組質粒與包膜質粒、包裝質粒共轉染宿主細胞，得到重組慢病毒；

(4)將所述重組慢病毒轉染CD3陽性T淋巴細胞，獲得靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞。

9.如權利要求8所述的靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞的制備方法，其特征在于，所述包膜質粒為PMD2G，所述包裝質粒為psPAX2，所述宿主細胞為HEK293T細胞。

10.一種如權利要求1-2任一項所述的靶向MAGE-A3的T細胞受體、如權利要求4所述的或如權利要求8-9任一項所述的制備方法制得的靶向MAGE-A3的T細胞受體基因修飾T細胞、或如權利要求5-6任一項所述的重組病毒載體或如權利要求7所述的宿主細胞在制備預防、診斷和治療惡性腫瘤藥物中的應用。