[發明專利]試劑在制備藥物中的用途、篩選藥物的方法以及藥物組合物

有效

• 申請號: 201711185446.6
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN107961380B
• 公開（公告）日: 2020-05-05
• 發明（設計）人: 李蓬;李祺琪
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/7088;A61K49/00;A61P3/04;A61P3/10;A61P5/50;A61P1/16
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 趙天月

本發明提出了試劑在制備藥物中的用途，該試劑用于抑制microRNA?708，該藥物用于下列的至少之一：降低細胞內甘油三脂的含量，抑制脂肪細胞的分化，抵御肥胖，促進胰島素的敏感性，提高呼吸代謝速率，提高能量消耗量，提高線粒體數量，上調氧化磷酸化或產熱相關基因，緩解胰島素抵抗，抵御脂肪肝，治療或預防II型糖尿病。發明人發現，利用抑制microRNA?708的試劑所制備的藥物可有效用于降低細胞內甘油三脂的含量，抑制脂肪細胞的分化，抵御肥胖，促進胰島素的敏感性，提高呼吸代謝速率，提高能量消耗量，提高線粒體數量，上調氧化磷酸化或產熱相關基因，緩解胰島素抵抗，治療或預防II型糖尿病。

技術領域

本發明涉及生物領域，具體地，本發明涉及試劑在制備藥物中的用途、篩選藥物的方法以及藥物組合物。

背景技術

MicroRNA(miRNA)是一類內生的、長度約為20-24個核苷酸的小RNA，其在細胞內具有多種重要的調節作用。每個miRNA可以有多個靶基因，而幾個miRNA也可以調節同一個基因。這種復雜的調節網絡既可以通過一個miRNA來調控多個基因的表達，也可以通過幾個miRNA的組合來精細調控某個基因的表達。據推測，miRNA調節著人類三分之一的基因。最近的研究表明大約70％的哺乳動物miRNA是位于TUs區(transcriptionunits,TUs)(Rodriguez et al,2004)，且其中大部分是位于內含子區(KimNam,2006)。一些內含子miRNA的位置在不同的物種中是高度保守的。miRNA不僅在基因位置上保守,序列上也呈現出高度的同源性(Pasquinelli etal，2000；Ruvkun et al，2001；LeeAmbros，2001)。miRNA高度的保守性與其功能的重要性有著密切的關系。miRNA與其靶基因的進化有著密切的聯系,研究其進化歷史有助于進一步了解其作用機制和功能。

microRNA在調控生命活動的多個方面起著至關重要的調控作用。但microRNA與肥胖以及糖尿病的關系還有待科學家進一步地探索和發現。

發明內容

本申請是基于發明人對以下事實和問題的發現和認識作出的：

發明人利用了實驗室已有的兩種小鼠模型：即ob(瘦素基因敲除)小鼠和ob/fsp27-/-(leptin和fsp27基因同時敲除)小鼠，這兩種小鼠分別表現為肥胖和瘦的兩種表型，發明人將這兩種小鼠的腹腔內脂肪分離出來，然后提取RNA，進行miRNAmicroarray和統計學分析、realtime PCR以及功能驗證，發現microRNA-708能顯著地提高細胞內甘油三酯的含量。

為此，在本發明的第一方面，本發明提出了試劑在制備藥物中的用途，所述試劑用于抑制microRNA-708，所述藥物用于下列的至少之一：降低細胞內甘油三脂的含量，抑制脂肪細胞的分化，抵御肥胖，促進胰島素的敏感性，提高呼吸代謝速率，提高能量消耗量，提高線粒體數量，上調氧化磷酸化或產熱相關基因，緩解胰島素抵抗，治療或預防II型糖尿病。發明人發現，利用抑制microRNA-708的試劑所制備的藥物可有效用于降低細胞內甘油三脂的含量，抑制脂肪細胞的分化，抵御肥胖，促進胰島素的敏感性，提高呼吸代謝速率，提高能量消耗量，提高線粒體數量，上調氧化磷酸化或產熱相關基因，緩解胰島素抵抗，治療或預防II型糖尿病，抵御脂肪肝。

根據本發明的實施例，上述用途還可以進一步包括如下附加技術特征至少之一：

根據本發明的實施例，所述抑制是通過shRNA，反義核酸，核酶，顯性負突變，CRISPR-Cas9，CRISPR-Cpf1和鋅指核酸酶至少之一實現的。進而有效實現敲除或敲低microRNA-708或抑制microRNA-708的功能。

根據本發明的實施例，所述抑制是通過shRNA實現的，所述試劑包含第一核酸，所述第一核酸具有SEQ ID NO：1。

AAGGAGCUUACAAUCUAGCUGGG(SEQ ID NO：1)。