[發明專利]一種檢測肌紅蛋白免疫熒光定量試紙條

在審

• 申請號: 201711181761.1
• 申請日: 2017-11-23
• 公開（公告）號: CN107703313A
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 何平;梁婷婷;李冰;陳潤文;周瓊華
• 申請（專利權）人: 中山市創藝生化工程有限公司
• 主分類號: G01N33/72
• 分類號: G01N33/72
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205
• 代理人: 舒勝英

1.一種檢測肌紅蛋白免疫熒光定量試紙條，包括吸水墊、硝酸纖維素膜、質控線、檢測線、結合墊、樣品墊、PVC底板；其中，結合墊上噴有鼠源肌紅蛋白單克隆抗體-熒光微球偶聯物；檢測線為鼠源肌紅蛋白單克隆抗體，質控線為羊抗鼠IgG多克隆抗體，且檢測線和質控線依次固定于硝酸纖維素膜上；樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊依次搭接并承載于PVC底板；其特征在于：鼠源肌紅蛋白單克隆抗體-熒光微球偶聯物使用儲存液進行浸漬處理、保存和稀釋；所述的儲存液配方為：PB的質量濃度為15～50mM、BSA的百分濃度為1.6％～10％、Tween-80的百分濃度為0.4％～10％、葡萄糖的百分濃度為0.4％～10％、甘氨酸的百分濃度為1.5％～10％、PEG4000的百分濃度為0.8％～5％、PEG20000的百分濃度為1％～8％、Proclin300或疊氮鈉的百分濃度為0.01％～1.5％，余量為水，pH為6.5～9.0。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于：所述的儲存液配方為：PB的質量濃度為20～40mM、BSA的百分濃度為0.5％～4.8％、Tween-80的百分濃度為0.5～6.0％、葡萄糖的百分濃度為0.5～3.0％、甘氨酸的百分濃度為2.0～7.0％、PEG4000的百分濃度為1.0～3.0％、PEG20000的百分濃度為1.5～4.0％、Proclin300或疊氮鈉的百分濃度為0.03～0.1％，余量為水，pH為7.0～8.0。

3.權利要求1～2任一項所述的試紙條的檢測方法，其特征在于，將該試紙條加樣層析后，檢測質控線和檢測線的熒光信號強度，并以質控線熒光信號強度校正檢測線的熒光信號強度，實現肌紅蛋白的定量檢測。

4.一種檢測肌紅蛋白免疫熒光定量試紙條的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將熒光微球活化后與鼠源肌紅蛋白單克隆抗體偶聯，偶聯完畢后加入封閉劑，保存于儲存液中；

(2)將鼠源肌紅蛋白-熒光微球偶聯物用儲存液稀釋后，噴于結合墊上，干燥保存；

(3)將鼠源肌紅蛋白單克隆抗體固定于硝酸纖維素膜上作為檢測線，將羊抗鼠IgG多克隆抗體固定于硝酸纖維素膜上作為質控線；

(4)在PVC底板上依次搭接地粘貼：樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊，并剪切成需要的寬度即成為熒光免疫層析試紙條；

所述的儲存液配方為：PB的質量濃度為120～40mM、BSA的百分濃度為0.5％～4.8％、Tween-80的百分濃度為0.5～6.0％，葡萄糖的百分濃度為0.5～3.0％、甘氨酸的百分濃度為2.0～7.0％、PEG4000的百分濃度為1.0～3.0％、PEG20000的百分濃度為1.5～4.0％、Proclin300或疊氮鈉的百分濃度為0.03～0.1％，余量為水，pH為7.0～8.0。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述的儲存液配方為：PB的質量濃度為20mM、BSA的百分濃度為1.8％、Tween-80的百分濃度為0.5％，葡萄糖的百分濃度為0.5％、甘氨酸的百分濃度為2％、PEG4000的百分濃度為1％、PEG20000的百分濃度為1.5％、Proclin300或疊氮鈉的百分濃度為0.03％，余量為水，pH為7.5。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：鼠源肌紅蛋白-熒光微球偶聯物在儲存液中的保存濃度為0.1～10mg/mL。

7.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述樣品墊的材質為玻璃纖維素膜或濾血膜。

8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：所述結合墊材質為玻璃纖維素膜。