[發明專利]誘導胚性愈傷組織的方法有效
| 申請號： | 201711176722.2 | 申請日： | 2017-11-22 |
| 公開（公告）號： | CN107853178B | 公開（公告）日： | 2020-07-28 |
| 發明（設計）人： | 張魯斌;孫曼麗;宋康華;賈志偉 | 申請（專利權）人： | 中國熱帶農業科學院南亞熱帶作物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京工信聯合知識產權代理有限公司 11266 | 代理人： | 郭一斐 |
| 地址： | 524091 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 誘導 胚性愈傷 組織 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種誘導胚性愈傷組織的方法，其特征在于，包括以下步驟：
用滅菌試劑對菜心種子進行滅菌；
用滅菌后的菜心種子作為誘導愈傷的材料，接種于誘導愈傷組織的第一培養基上，并進行光照培養；
將光照培養后的愈傷組織轉移至第二培養基上進行繼代培養，獲得胚性愈傷組織；
其中，所述滅菌步驟包括依次用70％v/v乙醇和1.5wt％次氯酸鈉水溶液處理所述種子；
所述第一培養基和所述第二培養基獨立地為在MS培養基中包括最終濃度分別為2.0mg/L的6-芐氨基嘌呤、1.0mg/L的萘乙酸、4.0mg/L的AgNO3、6～8g/L的瓊脂粉和25～30g/L的蔗糖。
2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述光照培養進行12～16天。
3.根據權利要求1所述的方法，其中，所述繼代培養為每10天繼代一次，連續繼代至少3次。
4.根據權利要求1所述的方法，其中，所述第一培養基和所述第二培養基的pH分別為5.7～5.8。
5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中，所述光照培養和所述繼代培養的每日光照條件分別為14小時光照后，繼續10小時黑暗，光照強度在1000～2000勒克斯之間，溫度為20～25℃。
6.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中，在滅菌步驟之后、光照培養步驟之前，用無菌去離子水清洗滅菌后的種子1至2次。
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