[發(fā)明專利]Pin1抑制劑ATRA的新型可生物降解控釋制劑及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711174730.3
• 申請(qǐng)日: 2017-11-22
• 公開（公告）號(hào): CN107929263A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊達(dá)云;盧坤平;周小珍;王士斌
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建醫(yī)科大學(xué);貝斯以色列女執(zhí)事醫(yī)療中心;華僑大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/52
• 分類號(hào): A61K9/52;A61K31/203;A61K47/34;A61P35/00;A61P29/00;A61P19/02;A61P11/06;A61P37/02
• 代理公司: 福州智理專利代理有限公司35208
• 代理人: 王義星

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及Pin1抑制劑ATRA的新型控釋制劑及其在Pin1相關(guān)疾病治療中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

分子靶向藥物在癌癥等疾病治療中起重要作用，但是在實(shí)體瘤的長(zhǎng)期治療中效果較差。其主要原因是當(dāng)前的分子靶向藥物大多是針對(duì)單一信號(hào)通路進(jìn)行腫瘤治療，而惡性腫瘤中往往存在多條致癌信號(hào)通路的同時(shí)激活，具有高度異質(zhì)性和復(fù)雜病因的肝癌尤為如此。為了提高對(duì)肝癌等腫瘤的治療效果，迫切需要開發(fā)能夠同時(shí)阻斷多條癌癥信號(hào)通路并無(wú)害的新型分子靶向藥物。

在細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)化信號(hào)通路中，其主要共同機(jī)制是受諸多激酶和磷酸酶調(diào)控的脯氨酸指導(dǎo)的蛋白磷酸化作用，而磷酸化蛋白的結(jié)構(gòu)和功能又進(jìn)一步受到Pin1的調(diào)節(jié)。Pin1是一種獨(dú)特的依賴于磷酸化修飾的肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶（peptidyl prolyl cis-trans isomerase, PPIase），Pin1在大部分腫瘤中過(guò)表達(dá)或高度活化，可同時(shí)激活超過(guò)40種癌基因和抑制超過(guò)20種抑癌基因。Pin1通過(guò)擾亂一系列致癌因子和抑癌因子的平衡而促進(jìn)腫瘤和腫瘤干細(xì)胞的生長(zhǎng)。更重要的是，Pin1基因敲除小鼠正常發(fā)育和生長(zhǎng)，這提示Pin1抑制劑的副作用微乎其微。很多科研機(jī)構(gòu)和公司已經(jīng)通過(guò)多種方式進(jìn)行了Pin1抑制劑的開發(fā)，例如肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶試驗(yàn)法、結(jié)構(gòu)或表型相似法、基于結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)法、基于底物模仿的設(shè)計(jì)法等。但是，這些Pin1抑制劑的功效和細(xì)胞滲透性較差，不能滿足要求。近期，我們開發(fā)了基于機(jī)制的高通量篩選法高通量藥物篩選方法，并鑒定出來(lái)Pin1的特異性抑制劑—全反式維甲酸（ATRA）（S. Wei, S. Kozono, L. Kats, M. Nechama, W.Z. Li, J. Guarnerio, et al., Active Pin1 is a key target of all-trans retinoic acid in acute promyelocytic leukemia and breast cancer, Nature Medicine 21 (2015) 457-466）。我們的研究證明ATRA可以選擇性地在腫瘤細(xì)胞中降解Pin1，然后同時(shí)阻斷多條受Pin1調(diào)控的致癌信號(hào)通路。

ATRA是維生素A的活性衍生物，目前已成為臨床上治療急性早幼粒細(xì)胞白血病的前線藥物，但是ATRA治療實(shí)體瘤的效果較差。其主要原因是ATRA的半衰期短，在人體僅45分鐘。此外，ATRA的水溶性差，容易受到光照、熱和氧化失效。因此，需要開發(fā)新的劑型，以克服這些缺點(diǎn)，增強(qiáng)ATRA的功效。目前，人們已嘗試采用多種方法制備ATRA的緩釋劑如負(fù)載ATRA的脂質(zhì)體，但是目前還沒(méi)有一種ATRA緩釋劑應(yīng)用于臨床，特別是用于實(shí)體瘤的治療。商品化的ATRA緩釋片雖然可以有效抑制腫瘤生長(zhǎng)，但該緩釋片僅能用于動(dòng)物。此外，現(xiàn)已報(bào)道的ATRA緩釋劑的包封率、穩(wěn)定性和緩釋性能還較差。而且，現(xiàn)有的緩釋劑制備方法復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、耗錢，制備條件劇烈，需要額外步驟進(jìn)行有機(jī)溶劑去除和產(chǎn)品干燥，這些處理可能會(huì)破壞載體的結(jié)構(gòu)，影響負(fù)載藥物的活性。因此，需要開發(fā)簡(jiǎn)便、快速、性價(jià)比高的路線制備生物相容性好、可生物降解和高效緩釋ATRA的新劑型，以用于臨床治療腫瘤、炎癥、關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、哮喘等Pin1相關(guān)疾病。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種Pin1抑制劑ATRA的新型可生物降解控釋制劑及其制備方法和應(yīng)用，避免傳統(tǒng)制備方法操作繁瑣、費(fèi)時(shí)、耗錢、制備條件劇烈的問(wèn)題，一步法制備干燥的載藥微球，并闡明該載藥微球增強(qiáng)藥物抗癌功效的作用機(jī)制。

本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種Pin1抑制劑ATRA的新型可生物降解控釋制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

a.將ATRA、包封材料添加到有機(jī)溶劑二氯甲烷中，通過(guò)攪拌獲得均勻的油相；所述的包封材料在超臨界二氧化碳中不溶或微溶，且能夠與ATRA共沉淀形成微米或納米粒；

b.在超臨界氣體的條件下，將步驟a得到的油相泵入反應(yīng)釜中，獲得負(fù)載ATRA的PLLA微球，然后繼續(xù)用超臨界氣體干燥微球30 min，充分去除二氯甲烷，獲得Pin1抑制劑ATRA的新型可生物降解控釋制劑。

上述步驟a中所述的包封材料包括PLLA、PLA-PEG嵌段共聚物。

上述步驟a中所述的油相中PLLA的質(zhì)量體積百分比濃度為0.5%~5 %，其中PLLA的分子量Mw為10~100 kDa，ATRA與PLLA的質(zhì)量比率為1%~5%。