[發(fā)明專利]一種發(fā)現(xiàn)和鑒定肝癌血清差異表達(dá)蛋白和驗證標(biāo)志物蛋白方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711174313.9 | 申請日: | 2017-11-22 |
| 公開(公告)號: | CN107894507A | 公開(公告)日: | 2018-04-10 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 于思創(chuàng);王海云 | 申請(專利權(quán))人: | 南寧科城匯信息科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/574 | 分類號: | G01N33/574 |
| 代理公司: | 南寧指北針知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙)45120 | 代理人: | 于勤,林培 |
| 地址: | 530022 廣西壯族自治區(qū)南*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 發(fā)現(xiàn) 鑒定 肝癌 血清 差異 表達(dá) 蛋白 驗證 標(biāo)志 方法 | ||
1.一種發(fā)現(xiàn)和鑒定肝癌血清差異表達(dá)蛋白和驗證標(biāo)志物蛋白方法,其特征在于:由以下步驟組成:
利用iTRAQ標(biāo)記結(jié)合MALDI-TOF MS/MS技術(shù),發(fā)現(xiàn)和鑒定肝癌血清差異表達(dá)蛋白,MRM驗證標(biāo)志物蛋白:利用iTRAQ 技術(shù)對30例肝癌和30例正常對照的血清進(jìn)行分析,共檢測到304個蛋白(置信度>95%),發(fā)現(xiàn)了38個差異蛋白(P<0.01),與對照相比,19個蛋白在肝癌血清中高表達(dá),19個蛋白在肝癌血清中低表達(dá),其中高表達(dá)2倍以上蛋白4個,低表達(dá)2倍以下蛋白6個;圖1顯示其中一個在肝癌中高表達(dá)的蛋白Alpha-1-antitrypsin;從上述iTRAQ標(biāo)記發(fā)現(xiàn)38個差異蛋白中利用MIDAS(MRM Initiated Detection And Sequencing,MIDAS)技術(shù),完成了14個差異蛋白MRM定性驗證;利用外標(biāo)法完成了三個蛋白進(jìn)行MRM定量驗證,在混合樣品中不僅完全證明了這14個差異蛋白的存在,而且還獲得了三個蛋白質(zhì)肽段的定量信息;圖2-3顯示的是其中兩個蛋白構(gòu)建的母子離子對;圖4顯示的是四個蛋白質(zhì)的MRM 圖譜。
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