[發(fā)明專利]一種用于抗體-藥物偶聯(lián)的雙取代馬來酰胺類連接子及其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711169847.2
• 申請日: 2017-11-22
• 公開（公告）號: CN109810039B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 沈競康;孟韜;馬蘭萍;王昕;張永良;于霆;陳驎;彭紅麗;杜志彥;王英
• 申請（專利權(quán)）人: 邁威（上海）生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07D207/456
• 分類號: C07D207/456;C07D401/14;A61K31/537;A61P35/00;C07K5/027;C07K5/06
• 代理公司: 北京瑞恒信達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉

本發(fā)明提供了一種與抗體偶聯(lián)的雙取代馬來酰胺類連接子及其制備方法和用途，具體地，本發(fā)明通過一類新的連接子將強細(xì)胞毒活性物質(zhì)和生物大分子進(jìn)行偶聯(lián)。該類連接子可選擇性與二硫鏈同時作用，從而大大提高偶聯(lián)物的物質(zhì)均一性與穩(wěn)定性。本發(fā)明的連接子所制備的偶聯(lián)物對于表達(dá)相應(yīng)抗原的細(xì)胞株具有高抑制活性。本發(fā)明還提供了上述偶聯(lián)物的制備方法和用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一類新型二硫鏈橋接交聯(lián)試劑、大分子、治療用偶聯(lián)物及其合成方法。更具體而言，本發(fā)明涉及通過基于取代馬來酰胺的二硫鏈橋接交聯(lián)試劑將細(xì)胞毒類藥物和大分子進(jìn)行交聯(lián)而得到的偶聯(lián)物及其制備方法和用途。

背景技術(shù)

作為新型的靶向治療藥物，抗體-藥物偶聯(lián)物(Antibody Drug Conjguate,ADC)開創(chuàng)了腫瘤治療方法的新紀(jì)元，其基本設(shè)計思想最早源于保羅·埃爾利希(Paul Ehrlich)于1913年首次提出的“魔術(shù)子彈”(Magic bullet)及藥物靶向輸送(Drug targeting)概念，即通過適當(dāng)?shù)妮d體將藥物靶向輸送到疾患部位。然而，受制于抗體及高活性細(xì)胞毒性藥物技術(shù)的制約，直到2000年第一個用于治療急性髓樣白血病(AML)的抗體-藥物偶聯(lián)物(Mylotarg^TM)才被FDA批準(zhǔn)上市。近期西雅圖基因公司(Seattle Genetics)研制的用于治療霍奇金淋巴瘤(HL)/復(fù)發(fā)性間變性大細(xì)胞淋巴瘤(ALCL)的新藥Adcetris^TM(2011)及健泰科生物技術(shù)公司(Genentech)研制的用于治療乳腺癌的新藥Kadcyla^TM(2013)相繼通過FDA批準(zhǔn)上市，則標(biāo)志著抗體-藥物偶聯(lián)物在腫瘤治療領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)入了快速發(fā)展階段。

抗體-藥物偶聯(lián)物一般由三部分組成：抗體或抗體類配體，小分子藥物，和將配體與藥物偶聯(lián)起來的連接子。目前進(jìn)入臨床試驗的抗體-藥物偶聯(lián)物結(jié)構(gòu)中，高活性的細(xì)胞毒性藥物通常是通過連接子連接在配體表面的賴氨酸殘基，或者抗體鉸鏈區(qū)域的半胱氨酸殘基(由鏈間二硫鍵部分還原得到)上，最佳的藥物/配體比值(DAR)為2-4。抗體表面大量的賴氨酸殘基(超過80個)以及偶聯(lián)反應(yīng)的非選擇性，導(dǎo)致偶聯(lián)數(shù)目和位點的不確定性，進(jìn)而導(dǎo)致生成的抗體-藥物偶聯(lián)物的不均一性。例如，T-DM1(平均DAR值為3.5)的DAR值分布為0-8。同樣，盡管抗體鉸鏈區(qū)的鏈間二硫鍵只有四對，但為達(dá)到最佳平均DAR值(2-4)的要求，需要部分還原鏈間二硫鍵。由于現(xiàn)有的還原劑(DTT，TCEP等)無法選擇性地還原鏈間二硫鍵，因此生成的偶聯(lián)物也不是均一的產(chǎn)物，由多種組分組成，其主要組分的DAR值為0,2,4,6,8，而且對應(yīng)每一種特定DAR值的組分都存在由于連接位點不同而形成的異構(gòu)體。抗體-藥物偶聯(lián)物產(chǎn)品的不均一性可以導(dǎo)致各成員組分間藥物動力學(xué)性質(zhì)，效價以及毒性的不均一性。例如，具有較高DAR值的組分在體內(nèi)被清除得更快，并導(dǎo)致更高的毒性。

為了解決抗體-藥物偶聯(lián)物均一性問題，定點偶聯(lián)技術(shù)近來得到了更多的青睞，這一技術(shù)從位點和數(shù)量兩方面來控制抗體藥物之間的偶聯(lián)。盡管這些技術(shù)都能夠?qū)崿F(xiàn)偶聯(lián)藥物位點和數(shù)量的可控，所應(yīng)用的抗體/蛋白都是通過基因重組的方式得到的。基因重組技術(shù)需要大量的工作和精巧的設(shè)計，以尋找合宜的位點供藥物偶聯(lián)或聚乙二醇修飾，而現(xiàn)有基因重組技術(shù)所獲得定點修飾的抗體/蛋白的表達(dá)量均較低，因此在大規(guī)模制備生產(chǎn)上非常耗時而且研發(fā)和最終產(chǎn)業(yè)化費用成本非常高。而通過改造后的抗體/蛋白也還需要進(jìn)一步驗證其自身的體內(nèi)藥效與安全性等因素。

針對以上偶聯(lián)技術(shù)存在的問題，通過簡單的化學(xué)方法對現(xiàn)有抗體實現(xiàn)定點偶聯(lián)目的，會節(jié)省大量的人力物力財力，因此更加富有吸引力。其中已有相關(guān)的研究包括：波利泰里克斯有限公司報道的一種偶聯(lián)技術(shù)CN200480019814.4；Igenica Biotherapeutics公司申請的WO2014197871A2；索倫托醫(yī)療有限公司申請的CN201380025774.3；上海新理念生物醫(yī)藥科技有限公司申請的CN201310025021.4等專利文獻(xiàn)。然而上述技術(shù)存在偶聯(lián)試劑合成路線較長、偶聯(lián)試劑化學(xué)穩(wěn)定性不佳、抗體偶聯(lián)物電泳圖較為雜亂，提示偶聯(lián)過程中可能存在副反應(yīng)、現(xiàn)有方案并未解決體內(nèi)循環(huán)過程中的巰基交換(逆邁克爾加成反應(yīng))等問題。