[發明專利]一種黑曲霉yy07菌株及其在固體發酵生產飼用酸性蛋白酶中的應用

有效

• 申請號: 201711156442.5
• 申請日: 2017-11-20
• 公開（公告）號: CN107760612B
• 公開（公告）日: 2020-04-17
• 發明（設計）人: 張秀江;胡虹;王秋菊;杜訊;谷立峰;胡宜亮;慕琦;呂國坤;卓輝
• 申請（專利權）人: 河南省科學院生物研究所有限責任公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/62;A23K20/189;A23K50/75;A23K50/30;A23K50/60;C12R1/685
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

本發明涉及黑曲霉yy07菌株及其在固體發酵生產飼用酸性蛋白酶中的應用，可有效解決生產飼用酸性蛋白酶的問題，將黑曲霉（Aspergillus niger）yy07接種到斜面培養基中進行擴增培養，在35?40℃下培養70?75h，置于斜面分離培養基中，菌絲長滿斜面分離培養基，作為斜面培養基種子，然后接種于固體發酵培養基中，在35?40℃培養，待菌絲布滿培養基表面，孢子全部變黑為止，然后接種到固體發酵培養基中，在35?40℃下培養，待在培養基上長出的白色菌絲將要變化成黑色孢子時，低于60℃進行干燥至含水率10%以下，粉碎，本發明有效用于生產飼用酸性蛋白酶，其制備方法科學、先進，原料豐富，成本低，節能、環保，易推廣應用，經濟和社會效益巨大。

技術領域

本發明涉及微生物，特別是一種黑曲霉yy07菌株及其在固體發酵生產飼用酸性蛋白酶中的應用。

背景技術

酸性蛋白酶是一種能在酸性（pH值2～5）條件下將大分子蛋白質迅速水解成肽類和部分游離氨基酸的酶類。酸性蛋白酶主要來源于動物的臟器和微生物分泌物，包括胃蛋白酶、凝乳酶和一些微生物蛋白酶。根據其產生菌的不同，微生物蛋白酶可分為霉菌酸性蛋白酶、酵母菌酸性蛋白酶和擔子菌酸性蛋白酶。根據作用方式可分為兩類：一類是與胃蛋白酶相似，主要產酶微生物是曲霉、青霉和根霉等；另一類是與凝乳酶相似，主要產酶微生物是毛霉等。由于酸性蛋白酶具有好的耐酸性，因此被廣泛地應用于食品、醫藥、輕工、皮革工藝以及飼料加工工業中。

國外關于酸性蛋白酶的研究和生產從20世紀初就開始了。乞今為止，已發現不少微生物可以產生酸性蛋白酶，如黑曲霉（Aspergillus niger）、大孢子黑曲霉突變株（A.niger var. macrosporus）、齋藤曲霉（A. saitoi）、宇佐美曲霉（A. usamii）、泡盛酒曲霉（A. awamori）、微紫青霉（Pen. janthinellum）、常規青霉（Pen. frequentens）、杜邦青霉（Pen. dupoti）、宛氏擬青霉（Paecilomyces varioti）、小孢米曲霉突變株（A. oryzacvar.microsporus）、根霉（Rhizopus sp.）、微小毛霉（M. pusillus）、粘紅酵母（Rhdotorulaglutinis）、粟疫霉（Endothia parasitica）、血紅色陀螺孔菌（Trametes sanguinca）、芽枝霉（Cladosporium sp.）等。1903年，德國科學家從動物的胰臟中提取出胰蛋白酶，并將其用于皮革的柔制。1911年美國科學家從木瓜中提取木瓜蛋白酶，并將木瓜蛋白酶用于除去啤酒中的蛋白渾濁物。自1954年吉田首次發現黑曲霉可產生酸性蛋白酶以來，國內外開始對微生物發酵生產酸性蛋白酶進行了廣泛的研究。1964年國外科學家發現大孢子黑曲霉突變體能產生兩種不同的酸性蛋白酶。1965年又從血紅色陀螺孔菌產酸性蛋白酶，并對該酶進行了純化和結晶。1968年從微小毛霉發酵物中篩選出一種酸性蛋白酶，并對其進行了純化和酶學性質分析。1995年國外科學家對煙曲霉酸性蛋白酶的基因進行了克隆和測序。2001年又從假絲酵母中篩選出一種酸性蛋白酶菌株，并對該酶進行了核苷酸序列分析和功能分析。到目前為止，國外科學家對酸性蛋白酶的結構和功能等已經進行了廣泛系統的研究。