[發明專利]簡并引物及利用該引物克隆植物中抗病蟲害蛋白基因的方法

在審

• 申請號: 201711148288.7
• 申請日: 2017-11-17
• 公開（公告）號: CN107937393A
• 公開（公告）日: 2018-04-20
• 發明（設計）人: 鮑錦庫;吳傳芳;梁丹鳳;龍鑫;袁媛
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/29;C12N15/10
• 代理公司: 成都中亞專利代理有限公司51126
• 代理人: 李文榮

1.一種簡并引物，其特征在于：

上游引物：5’- AYGGNCCNTAYACNTTYATHATGC-3’；

下游引物： 5’- RTNAGTNCCNGTNGCCCAYT-3’；

所述簡并引物中：R=A/G，Y=C/T，M=A/C，K=G/T，S=G/C，W=A/T，H=A/T/C，B=G/T/C，V=G/A/C，N=A/T/G/C。

2.一種大規模克隆植物中抗農業病蟲害蛋白基因的方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：利用權利要求1所述的一對簡并引物對單子葉植物甘露糖結合蛋白基因的保守序列進行PCR反應，然后以此PCR產物為反應模板，利用3’，5’RACE的方法，對該單子葉植物甘露糖結合蛋白基因序列進行PCR反應，最終克隆到目的基因。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，單子葉植物包括但不局限于蘭科（Orchidaceae）、百合科（Liliaceae）、天南星科（Araceae）、石蒜科（Amaryllidaceae）植物。

4.根據權利要求2或3所述方法得到的具有抗農業病蟲害生物活性的蛋白。

5.根據權利要求4所的蛋白，其特征在于，所述農業病蟲害包括：刺吸式口器害蟲中的棉蚜、麥蚜、桃蚜蚜蟲、褐飛虱、葉蟬及鱗翅目害蟲；以及水稻稻瘟病、紋枯病、小麥赤霉病。