[發明專利]一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法及試劑有效
| 申請號： | 201711138666.3 | 申請日： | 2017-11-16 |
| 公開（公告）號： | CN109385418B | 公開（公告）日： | 2022-07-22 |
| 發明（設計）人： | 尤其敏;朱勤鋒;朱羅羅;袁旦一;李玲;饒煥新;劉瑩;孫剛;胡江文;趙博熹;胡林;何謙 | 申請（專利權）人： | 杭州優思達生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京元中知識產權代理有限責任公司 11223 | 代理人： | 另婧 |
| 地址： | 310053 浙江省杭州市*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 動物 樣本 病毒 細菌 核酸 提取 方法 試劑 | ||
1.一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，取動物樣本，加入裂解液進行室溫裂解，得到裂解反應液；再向裂解反應液中加入體積濃度為95%的乙醇溶液，移至含硅膠吸附膜離心柱，然后采用低速離心的方式進行吸附、清洗和洗脫；
所述裂解液中含有硫氰酸胍 4mol/L、尿素 7 mol/L、氯化鈉 0.1 mol/L、乙二胺四乙酸二鈉 20 mmol/L、三羥甲基氨基甲烷 20 mmol/L、吐溫-20 5 wt %、月桂酰肌氨酸鈉 0.5wt %；
清洗時采用清洗液，洗脫時采用洗脫液；所述清洗液為0.3mol/L的醋酸鈉溶液；所述洗脫液為3 mmol/L的三羥甲基氨基甲烷溶液；所述動物樣本為血清或血漿。
2.根據權利要求1所述的一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，所述動物樣本與裂解液的體積比為5：3～6，動物樣本的裂解的條件為：室溫下靜置10-15分鐘。
3.根據權利要求2所述的一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，所述動物樣本與裂解液的體積比為5：4～6。
4.根據權利要求2所述的一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，動物樣本的裂解的條件為：室溫下靜置15分鐘。
5.根據權利要求1-4任一所述的一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，所述的低速離心的相對離心力不大于2000×g，離心1-3min。
6.根據權利要求5所述的一種用于動物樣本中病毒/細菌核酸提取的方法，其特征在于，離心1min。
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