[發明專利]酶膜耦合法制備均一分子量膠原蛋白多肽在審
| 申請號： | 201711134134.2 | 申請日： | 2017-11-16 |
| 公開（公告）號： | CN109796528A | 公開（公告）日： | 2019-05-24 |
| 發明（設計）人： | 南杰 | 申請（專利權）人： | 南杰 |
| 主分類號： | C07K14/78 | 分類號： | C07K14/78;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 710000 陜西*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制備 膠原蛋白多肽 酶膜耦合 均一 生物技術領域 膠原蛋白酶 生物材料 制品純度 膠原肽 酶解 分解 | ||
【權利要求書】：
1.酶膜耦合法制備均一分子量膠原蛋白多肽，制備的肽段可用于膠原分型、電泳和架橋分析，也可用于生物材料的制備，其特征在于制備過程包括下列各步驟：
(1)取市售或自制膠原溶于1～50ml的50～80％(v/v)乙酸溶液中，通氨氣5～20min除氧；
(2)加入CNBr固體10～80mg或濃度為90～99％(w/v)CNBr的乙酸溶液(所用乙酸濃度與上步驟一致)，再次通氨氣1～5min；
(3)密封容器中攪拌反應2～40小時，控制反應溫度為4～35。℃，反應完成后，加入2～15倍的去離子水稀釋并凍干；
(4)凍干樣品再加2～15倍的去離子水稀釋并凍干，可如此反復多次，直至過量反應物和副產物脫除干凈；
(5)將冷凍干燥樣品10～100mg溶解于2～200ml起始緩沖液中，30～50℃條件下加熱處理8～20min后上柱，起始緩沖液與洗脫緩沖液梯度洗脫；
(6)以226nm測定吸光度，分別收集峰I、峰II、峰III，凍干即為三個肽段。
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