[發明專利]一種基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法在審
| 申請號： | 201711130951.0 | 申請日： | 2017-11-15 |
| 公開（公告）號： | CN109283329A | 公開（公告）日： | 2019-01-29 |
| 發明（設計）人： | 孔惠 | 申請（專利權）人： | 廣州弗賽生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/543 | 分類號： | G01N33/543;G01N33/574;G01N33/532 |
| 代理公司： | 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 湯東鳳 |
| 地址： | 510000 廣東省廣州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 靶標物 磁性微球表面 核酸適配體 抗體 抗體富集 快速檢測 磁珠 擴增 檢測 生物技術領域 等溫擴增法 三明治結構 特異性識別 磁性微球 濃度結果 富集 | ||
1.一種基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟1：在磁性微球表面標記能夠識別靶標物的抗體或核酸適配體；
步驟2：在步驟1得到的磁性微球表面通過抗體或核酸適配體富集靶標物；
步驟3：將能夠特異性識別靶標物的DNA標記物與步驟2得到的磁性微球的靶標物結合；
步驟4：將磁性微球表面的帶有抗體或核酸適配體-靶標物-DNA標記物的三明治結構分離，并通過PCR或等溫擴增法擴增DNA標記物；
步驟5：檢測擴增后的DNA標記物，得到靶標物的濃度結果。
2.根據權利要求1所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，靶標物為細菌、病毒、病原體、細胞或蛋白質。
3.根據權利要求1所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，步驟1的磁性微球為經過羧基化的磁性微球。
4.根據權利要求3所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，所述的DNA標記物為末端帶有氨基或羧基的單鏈核酸。
5.根據權利要求4所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，所述的步驟2中抗體或核酸適配體與靶標物的偶聯、步驟3中靶標物和DNA標記物的偶聯均通過碳化二亞胺進行偶聯。
6.根據權利要求1所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，所述的步驟5中擴增后的DNA標記物通過熒光定量方法或核酸膠體金檢測卡進行檢測。
7.根據權利要求1所述的基于PCR和磁珠抗體富集技術的快速檢測靶標物的方法，其特征在于，所述的磁性微球的粒徑為25nm。
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