[發明專利]一種高產納豆激酶的枯草芽孢桿菌及其應用在審
| 申請號： | 201711130808.1 | 申請日： | 2017-11-15 |
| 公開（公告）號： | CN107841473A | 公開（公告）日： | 2018-03-27 |
| 發明（設計）人： | 龔愛華;朱沛煌;嚴永敏;曾建;彭琬昕;杜鳳移;崔恒林 | 申請（專利權）人： | 江蘇大學 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;C12N9/56;A23L11/00;A23P10/28;A23L33/10;C12R1/125 |
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| 地址： | 212013 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高產 激酶 枯草 芽孢 桿菌 及其 應用 | ||
1.一種枯草芽孢桿菌亞種，保藏編號：CGMCC No.14435，建議的分類命名：枯草芽孢桿菌亞種Bacillus subtilis.。
2.一種利用權利要求1所述的枯草芽孢桿菌亞種制備納豆激酶發酵液與提純品中的方法，按照下述步驟進行：
1)含有納豆激酶發酵液的制備：
將枯草芽孢桿菌亞種Bacillus subtilis subsp.UJS-11菌株接種到LB平板培養基上37℃活化24小時，接種到種子液二次活化后按5％的接種量接種到液體發酵培養基中，37℃，200rpm條件下發酵48h，取發酵液離心，利用瓊脂糖——纖維蛋白平板法測得發酵上清液酶活為35850u/ml；
2)納豆激酶的提純：
將發酵液在4℃，10000rpm，20min條件下離心，收集發酵上清；向上清液中分多次加入硫酸銨粉末，達到30％飽和度；4℃低速顛倒混合鹽析6小時，4℃，10000rpm，20min條件下離心，收集上清液；向上清液中分多次加入硫酸銨粉末，達到75％飽和度；4℃低速顛倒混合鹽析6小時，4℃，10000rpm，20min條件下離心，收集沉淀；用適量PH7.2的PBS緩沖液溶解沉淀，-80℃冷凍，送凍干機凍干，收集凍干粉即為高純度的納豆激酶粉，利用瓊脂糖——纖維蛋白平板法測得高純納豆激酶粉酶活為594730u/g。
3.一種可預防心腦血栓疾病的納豆激酶保健品的的制備方法，按照下述步驟進行：
1)按質量百分比，將干燥后含水量在4-6％的權利要求2所制備的高純納豆激酶粉5％，納豆凍干粉35％，維生素C 10％，乳酸鈣10％，枸杞提取物5％，百合提取物5％，麥芽糊精26％在混料機混合均勻；
2)經過公知方法的造粒，干燥后加入4％的硬脂酸鎂，混合均勻后，送入壓片機壓片，每片500mg。
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